ALM-MM; Automatisk gramfarging med Previ Color Gram v. 2.2

Arbeidsbeskrivelse

 

ANSVAR

 

Alle bioingeniører med opplæring på bakteriologi.

 

HMS/sikkerhetsinformasjon

 

Se ecoonline stoffkartotek

 

ARBEIDETS GANG

 

Prøvematerialet og bearbeidelse av dette

 

·         Lag utstrykene så tynne som mulig. For spinalvæske, se egen prosedyre.

·         Lufttørk før farging. Benytt eventuelt inkubator for hurtigere tørking.

·         Gramfarging skal gjøres på ferske kulturer (24-48 timer) da eldre kulturer lettere avfarges.

·         Antibiotikabruk kan føre til økt avfarging av grampositive bakterier.

 

Reagenser og klargjøring av disse

 

·         RA1: Acetone Safranin solution (Biomerieux)

·         RB: Iodine solution (Biomerieux)

·         RC: Crystal violet solution (Biomerieux)

·         D: Destillert vann

·         E: Etanol eller metanol

Sjekk reagensnivå og utløpsdato. Instrumentet har automatisk overvåkning av væskenivå på reagensene. Man må allikevel utføre en visuell vurdering før hver kjøring.

Bytte av reagens:

1.       Trykk på det blinkende reagensflaskeikonet.

2.       Ta pumpeslangen ut av den gamle flasken og fest på den nye.

3.       Bruk strekkodeleseren for å lese strekkodene fra den nye reagensflasken.

 

Dersom det er store avvik på visuell og automatisk kontroll av væskenivå kan det utføres kalibrering. Se brukermanual.

Sjekk også avfallsbeholderen.

Bytte av avfallsbeholder:

Sett dunken i gangen utenfor avfallsrom. Den blir hentet, tømt og returnert av portørtjeneste. OBS! Ikke fyll ut deklarasjonsskjema.

Fremgangsmåte/Utførelse av analysen

 

Daglig vedlikehold:

Trykk på knappen på forsiden av instrumentet ved oppstart. Dette tar instrumentet ut av standby. Man vil få beskjed om å utføre daglig vedlikehold («pattern test»). Dette gjøres for å sjekke navmønster for å avdekke eventuelle tette dyser, og det vil også fungere som en priming av rørsystemet i instrumentet da det ved oppstart fortsatt vil ligge etanol i slangene.

 

Utførelse av Patterntest:

1.       Velg «Maintenance»

2.       Velg «Pattern Test».

3.       Hold et tørkepapir eller benkepapir foran dysene nær drivnavet.

4.       Sjekk hver dyse i tur og orden og se etter en jevn rundt avsetting. Merk at det kan bli noe svak farge på fargeløsningene. Dette skyldes alkoholrester i slangesystemet etter rengjøringen som utføres når instrumentet settes i standby på ettermiddagen. Om det oppleves vanskelig å vurdere kan man repetere testen der man har behov, eventuelt prime dysene før start av patterntest.

 

Bilde: Eksempel på godkjent resultat til venstre og underkjent resultat til høyre.

Dersom resultatet ikke er tilfredsstillende, se under annet vedlikehold. På slutten av arbeidsdagen settes instrumentet i standby. Det vil starte trinnet «Clean Alcohol Purge» som vil fordele alkohol i dysene A, B og C.

Når rengjøringssyklusen er ferdig vaskes innsiden av kammeret og dysene med 70 % etanolløsning. Tørk godt av.

Daglig avslutning:

1.       Sett instrumentet i standby. Instrumentet vil automatisk prime slangene med alkohol.

2.       Tørk over brønnen og undersiden av lokket med papir og 70 % etanol.

 

Fremgangsmåte:

 

Logg på din egen bruker.

Preparatene flammefikseres før farging.

1.       Velg fargeprofil etter hvilket prøvemateriale som skal farges.

·         Previ Color gram program 1 anbefales til bruk for alle prøvematerialer med unntak av ekspektorat og sekret.

·         Previ Color Gram program 2 anbefales til bruk for ekspektorat og sekret.

 

2.       Velg «Load Slides» i menyen. Benytt preparatarket og scan barkoden til prøvene som skal være med.

Sett objektglassene inn i karusellen med det første objektglasset i posisjon 1. Objektglassene må settes inn diagonalt til hverandre. Hvis det farges et odde antall objektglass må det benyttes et tomt objektglass for å balansere karusellen. Hvis det er ledige plasser i karusellen må det i tillegg benyttes tomme objektglass foran det fremste preparatet som inneholder prøve (dvs. posisjon 11 og 12). Dette vil hindre at det sprayes for mye reagens på preparatene som da kan føre til overfarging.

3.       Instrumentet vil tilpasse antallet slides i karusellen automatisk ut ifra hvor mange prøver som er scannet.Trykk start.

 

Ukentlig vedlikehold:

Utføres hver tirsdag som en del av vedlikeholdsposten. Automatisk varsling aktivert på instrumentet.

·         Utfør Volumtest:

1.       Velg «maintenance»

2.       Velg «volume test»

3.       Følgende gjøres for A, B, C og E:

Hold plastrør inntil dysen som skal sjekkes og trykk start. Legg inn mengden når man får beskjed om det og vurder opp mot tabell 1.

Gjenta for hver dyse.

Følgende gjøres for D-dysene: Det vil skylles igjennom på både front og rear samtidig, men man får ikke registrert resultat for begge i samme omgang. Gjennomfør derfor testen to ganger og velg hvilken dyse det skal registreres resultat for etter den har skylt gjennom. Hold eventuelt et papir over dysen du ikke kontrollerer.

 

Tabell 1

Dersom volumet er innenfor godkjent område: velg back to ganger for å komme tilbake til hovedbildet.

4.       Dersom volumet er utenfor godkjent område: Se under annet vedlikehold.

·         Vask over karusellen med 70 % alkohol

·         Skyll avfallsslangen med 200-300 ml 70 % alkohol for å hindre tilstopping. Hele mengden helles ned i avfallsåpningen i en vending.

·         Utfør pattern test.

Månedlig vedlikehold:

Utføres av fag-/spesialansvarlig og superbrukere. Automatisk varsling aktivert på instrumentet.

·         Demonter og rengjør alle dyser:

1.       Bruk dyseverktøyet i vedlikeholdssettet til å ta dysene ut fra kammeret.

2.       Fjern dyseinnsatsen i plast. For å gjøre prosessen lettere kan du bruke en serviett. OBS! Ikke bruk skarpe verktøy for å løsne denne.

3.       Skru løs kompresjonsskruen ved å bruke umbracconøkkelen som er inkludert i vedlikeholdssettet.

4.       Legg delene i dyserengjøringsløsning (fortynnes med 90 % sprit i forholdet 1:1)

OBS! Bruk riktig beholder til riktig dyse. Det er viktig å montere samme dyse tilbake i rett posisjon. La delene ligge i bløt så lenge som mulig.

5.       Hold silen over beholderen før væsken fjernes slik at de ikke havner i avfallsåpningen. Bruk vaieren i vedlikeholdssettet til rengjøring av dyseåpningen.

6.       Legg tilbake i beholderen med destillert vann.

7.       Gjør så det samme med 70 % alkohol.

8.       Påfør en liten mengde silikonbasert smøremiddel til skruegjengene på kompresjonsskruene.

9.       Remonter dysen i samme rekkefølge og fest i sin originale posisjon.

10.   Trinnene gjentas for hver dyse.

·         Desinfiser beholder for destillert vann:

Erstat reagensflaske D (destillert vann) med en ren som først skylles med destillert vann og så fylles med destillert vann. Vask den gamle flasken med 70 % etanol ved å vende flasken flatt noen ganger. Legg den så i hylla uten kork slik at etanolen fordunster.

·         Utfør volumtest og patterntest (se under daglig og ukentlig vedlikehold)

·         Farg kontrollpreparat (E.coli ATCC 25922 og Staph. aureus ATCC 25923 ) og vurder resultatet.

·         Dokumenter vedlikeholdsoppgavene når de er utført gjennom menyvalget «Record Maintenance»

 

Ekstra vedlikehold:

Dersom mønster og volumtest ikke godkjennes: kontakt fagansvarlig eller superbruker.

Se brukermanual for følgende tiltak:

·         Manuell priming av reagenskretsene

·         Rengjøring av dyser