Alle bioingeniører som er opplært til å utføre denne type analysearbeid ved ALM og som har ansvar for kvalitetskontroll av blodkultursystemet.
BACTEC FX 9000 bruker indirekte CO2 måling med hjelp av fluorescensteknikk. Systemet er laget for hurtig deteksjon av bakterielle infeksjoner og soppinfeksjoner i blodprøver. Prøvene kan tas direkte fra pasient ved hjelp av Vacutainersystemet. Bactecsystemet måler CO2-utviklingen i mediet som forårsakes av mikroorganismenes metabolisme.
En fargesensor i flaskens bunn reagerer med CO2 og blir dermed fluorescerende. Instrumentets fotodetektor måler dette.
Hovedreferanser:
(1) Strategirapport fra Strategimøte 2006: Kvalitetssikring i bakteriologi,
Kvalitetskontroll av blodkultur 2.8, Fredrik Müller, Mikrobiologisk institutt, Rikshopitalet
Tilleggsreferanser:
(2) Aktuelle pakningsvedlegg for blodkulturflasker fra Becton Dickinson finnes på filplassering I:\HNT - ALM Fellesområde\Driftsenheter\MM\Pakningsvedlegg\Puls (BD) - 109604\Blodkulturer
Eksterne valideringer: FDA-godkjenning med Dokument nr. K083572
Hovedreferansen anbefaler månedlig kvalitetskontroll av instrument. Vi begrenser kontrollering til alle nye forsendelser. Dette utføres fortløpende, ca. hver 1-2 måned. (1)
1 aerob ped.blodkulturflaske E.coli ATCC 25922
1 aerob ped. blodkulturflaske uten tilsetning av mikrobe (sterilkontroll)
1 aerob blodkulturflaske med E. coli ATCC 25922
1 aerob blodkulturflaske med Bacteroides fragilis ATCC 25285
1 aerob blodkulturflaske uten tilsetning av mikrobe (sterilkontroll)
1 anaerob blodkulturflaske med Bacteroides fragilis ATCC 25285
1 anaerob blodkulturflaske med E. coli ATCC 25922
1 anaerob blodkulturflaske uten tilsetning av mikrobe (sterilkontroll)
1 blodkulturflaske sopp tilsatt Candida albicans CCUG 5594
1 blodkulturflaske sopp uten tilsetning av mikrobe (sterilkontroll)
Laboratoriet mottar ringtester fra Folkehelseinstituttet hvor blodkulturisolat inngår i analyseprogrammet.
En gang i året blir ett isolat kontrollert mot Bactec og Filmarray.
Det tillages da suspensjon for hver enhet, altså 2 flasker på Levanger og 2 flasker på Namsos. I tillegg blir det utført filmarray på en positiv flaske.
Spesialbioingeniør for faggruppe 1 har ansvar for å overholde revisjonsfrister. Spesialbioingeniør i samråd med fagbioingeniør er ansvarlig for eventuelle oppdateringer. Fagbioingeniør er ansvarlig for dokumentstyring i EQS.
Spesialbioingeniør på gruppen har ansvar for tilllaging av systemkontrollene, samt oppfølging av resultat.
Bioingeniør som arbeider med blodkultur har ansvaret for det praktiske arbeidet og besvarelsen av positive blodkulturkontroller.
Flaskene er oppbevart ved feil temperatur/tid før de er satt i blodkulturskapet
Defekter med blodkulturskapet, feil temperatur i skapet, feil på mediene.
Kvalitetskontroll av mediene fra produsenten:
Hver batch er kontrollert og godkjent i henhold til ”quality assurance for comercially prepeared microbiological culture media , NCCLS M22-A”, 1996.
Produsent har definert holdbarhetsdato på flasker.
Kvalitetskontrollsertifikat er tilgjengelig på produsentens nettside. Mediene er CE godkjent.
Service:
Avdelingen har serviceavtale med leverandør om årlig service av blodkulturskapene.
Det utføres kalibrering av flasketermometerene til blodkulturskapet årlig.
Forarbeid (utføres av spesialbioingeniør, faggruppe 1 dersom ikke annet er nevnt):
Levanger:
Bestilling- og mottaksansvarlig for blodkulturflasker (spesialbioingeniør på faggruppe 2) er ansvarlig for ankomstregistrering og visuell kontroll av forsendelsen:
Hver flaske kontrolleres for:
- Om flasken er blakket eller mørk i fargen.
- Toppen må ikke bule eller være innover
- Eventuell lekkasje
-
Forkast flasker som har en av disse feilene (2).
Beskjed gis så spesialbioingeniør, faggruppe 1 som skal klargjør intern kontroll.
Valg av kontroll baseres på hva slags flasker som mottas. Se under punktet «intern kontroll».
Beskjed om positive blodkulturkontroller til inkubering legges inn i vaktperm til Medisinsk biokjemi. I tillegg henges en beskjed på blodkulturskapet. Dette gjøres for å unngå at de bruker unødig tid på kveld for å så ut disse etter nødrutiner.
Namsos
Fagansvarlig på Namsos gir beskjed ved mottak av nye blodkulturflasker per mail. Flasker sendes med transportkassen til Levanger slik at kontrollene kan tillages her før de returneres for inkubering i Bactec på Namsos. Send mail til fagansvarlig om at de er på vei. Legg ved en beskjed i kassen om at det er kontrollflasker som skal settes i inkubator.
Rekvirering i Beaker:
Hver kontroll bestilles i beaker. OBS! Hver Bactec skal kontrolleres i samme omfang. Det vil si at det må lages dobbelt sett med kontroller for Levanger og Namsos.
Rekvirent: HNT, Sh. Levanger, Avd. for lab.medisin, Med. Mikrobiologi
«Pasient» velges etter hvilke flasker som skal kontrolleres (se avsnittet «Intern Kontroll») og hvor de skal kontrolleres.
Valg av pasient(kontroll) som benyttes på Levanger:
- Blodkulturkontroll Levanger, Caal Ccug 5594
- Levanger, Sterilkontroll Blodkultur
- Blodkulturkontroll, Esco Atcc 25922
- Blodkulturkontroll, Bafr Atcc 25285
Valg av pasient(kontroll) som benyttes på Namsos:
- Blodkulturkontroll Namsos, Esco Atcc 25922
- Namsos, Sterilkontroll Blodkultur
- Namsos, Bafr Atcc 25285 Blodkulturkontroll
Dersom det skal kontrolleres både aerobe og anaerobe blodkulturflasker samtidig velges pakken «Mikroorganismer i blodkultur barn og voksne over 36 kg».
For PED-flasker velges analysen «Blodkultur barn <13 kg.
For Sopp-flasker velges analysen «Blodkultur, sopp»
Dato: Velg dato og tidspunkt for rekvirering.
Labkommentar: Skriv inn .RQI da det ikke skal knyttes en scanning til rekvisisjonen.
Klistre etiketten på flasken.
Scan så flasken i mottak. Velg fanen «detaljer». Under boksen «flagg», marker «annet, se kommentar» og legg inn lot-nummer, holdbarhetsdato, flaskenummer og instrument-ID i kommentarlinjen. Merk etiketten med instrumentnummer slik at dette er sporbart når flaskene skal inn i Bactec.
Registrering i kontrollskjema:
Før inn informasjon knyttet til flaskene som skal kontrolleres i kontrollskjema på følgende filplassering: I:\HNT - ALM Fellesområde\Driftsenheter\MM\Rapporter og registreringer\Bakteriologi\KVALITETSKTR. BLODKULTUR
Tillaging av suspensjon for positive kontroller:
Utgangspunktet er en 0,5 McFarland løsning (ca 1,5 *108 cfu/ml) til bakteriesuspensjon
og 0,5 McFarland løsning (ca 106gjærceller/ml) til soppkulturen
Fortynningsserie
|
|
Rør 1 |
Rør 2 |
Rør 3 |
Rør 4 |
Rør 5 |
Rør 6 |
Rør 7 |
|
Kons. (bakt./ml) |
108 |
107 |
106 |
105 |
104 |
103 |
102 |
|
Innhold |
|
|
|
|
|
|
|
|
NaCl |
5 ml |
900 µl |
900 µl |
900 µl |
900 µl |
900 µl |
900 µl |
|
|
|
100 µl Fra rør 1 |
100 µl Fra rør 2 |
100 µl Fra rør 3 |
100 µl Fra rør 4 |
100 µl Fra rør 5 |
100 µl Fra rør 6 |
|
Tilsammen |
5000 µl |
1000 µl |
1000 µl |
1000 µl |
1000 µl |
1000 µl |
1000 µl |
Ta ut 1,0 ml fra rør 7 med sprøyte og tilsett flasken.
Steril kontroll: Flaske settes til inkubering uten tilsetning.
Dersom man skal benytte samme kontroll på flere flasker (f.eks. at man har mottatt aerobflaske og anaerobflaske i samme forsendelse) kan man tilsette 900 µl ekstra i rør 7 og tilsette 100 µl ekstra fra rør 6 slik at man får en total mengde på 2000 µl.
Vekst av aerobe bakterier forventes innen 48 timer. Vekst av anaerobe bakterier og gjærsopp forventes innen 72 timer.
Tillaging av suspensjon for intern kontrollrutine på blodbank:
Blodbanken kan etterspørre suspensjon med E.coli ATCC 25922 når de mottar dipslides til sterilkontrollering. Da tillages en 20 ml suspensjon med konsentrasjon 104.
Etterarbeid på positive flasker (utføres av bioingeniør på blodkulturplass):
· Det gjøres utsæd på selektiv skål som gir den sikreste visuelle identifiseringen:
- E.coli ATCC 25922: Urinskål. Rosa kolonier gir tilstrekkelig identifikasjon.
- Bacteroides fragilis ATCC 25285: FAA-agar med metronidazole 5 µg.
Sone rundt metronidazole gir tilstrekkelig identifikasjon.
- Candida albicans CCUG 5594: Candida chromagar.
Rosa kolonier gir tilstrekkelig identifikasjon.
· Endelig verifisering kan gjøres med en gang man har oppvekst. Skåler kan kastes.
· Dersom ingen vekst av aktuell kontroll gis beskjed til faggruppe 1.
· Spesialbioingeniør på faggruppe 1 er ansvarlig for å ettergå resultatene og føre inn i kontrollskjema på følgende filplassering: I:\HNT - ALM Fellesområde\Driftsenheter\MM\Rapporter og registreringer\Bakteriologi\KVALITETSKTR. BLODKULTUR