ALM-MM-Puss; Vurdering av grampreparat v. 2.3

Hensikt

Hvordan vi vurderer grampreparat fra prøvematerialer til bakteriologisk dyrkning.

Omfang

Gjelder for alle bioingeniører som er opplært i vurdering av denne typen prøver.

Grunnlagsinformasjon

ANALYSEPRINSIPP OG TERMINOLOGI

Mikroskopering er en viktig del av diagnostikken. Det kan gi et raskt foreløpig svar (før evnt oppvekst), samt at det kan si noe om kvaliteten på prøvemateriale.

Lysmikroskop har et tolinsesystem (objektiv mot objektet, okular mot øyet). 3 objektiver; 10x, 40x, og 100x, samt okular ca10x.

Immersjonsolje brukes for å unngå lystap i mellomrommet mellom objekt og objektiv ved 10x og 100x.

De fleste vanlige bakterier er i størrelsesorden 0,5-1,5 µm, mens gjærsoppceller er ca 8 µm i diameter.

MEDISINSK INDIKASJON

Grampreparat fra ulike materialer hvor en vil se etter mikrober, vurdere cellebilde samt vurdering av kvaliteten på prøvemateriale.

REFERANSER

Hovedreferanse: (1) SOH’s prosedyre Mikroskopering av Grampreparat, dok.nr. 15324 (EQS) 8.2.11  

Tilleggsreferanser: (2) Konsensusmøte nr 9, 1995 Bakteriologisk diagnostikk av luftveisinfeksjoner, red.. J Mæland, R Hjetland, J Lassen og P Sandven.

(3) Strategimøte nr 17, 2003: Nedre luftveisinfeksjoner, red. Pål A Jenum, Tone Skarpaas og Olav B Natås

(4)https://www.laeringsportalen.no/uploaded/scormcourse/Rasjonell_antibiotika_bruk01/a001_mikrobiologisk_diagnostikk.html

Nyttig litteratur: Clinical Microbiology Procedures Handbook, vol.1, second edition 2004.

Arbeidsbeskrivelse

ANSVAR

Alle leger og bioingeniører som mikroskoperer grampreparat.

Fagbioingeniør, gruppe 1 har ansvaret for å oppdatereprosedyren.

ARBEIDETS GANG

Fremgangsmåte/Utførelse av analysen

 

En dråpe prøvemateriale deponeres på et objektglass før den strykes lett utover til rett tykkelse. Preparatet tørkes deretter før det fikseres og farges, manuelt eller i Previ Color Gram fargemaskin, se ALM-MM-Id; Manuell gram farging og ALM-MM; Automatisk gramfarging med Previ Color Gram.

 

Usikkerhetsbidrag, feilkilder og interferens

  • For tykt preparat, gir artefakter og fargenedslag
  • For tynt preparat, feil vurdering av prøvemateriale

 

Vurdering av preparat fra sterile og usterile prøvematerialer (unntatt luftveisprøver)

 

Benytt 100x objektiv.

 

  • Mikrobefunn eller ingen sikre mikrober (.ISM)
  • Mengde leukocytter
    • Ingen (L0),
    • få, 0-3/synsfelt (L1)
    • moderat, (4-20/synsfelt (L2)
    • rikelig, >20/synsfelt (L3).

 

  • Mengde plateepitelceller (P0, P1, P2, P3) (gjelder luftveispreparater)

Besvarelse av luftveispreparater se ALM-MM-puss; Vurdering av øvre og nedre luftveisprøver (inkludert øyeprøver)

 

For spinalvæsker:

Ta med .MLEU: For leukocyttmengden se svar på celletelling fra Medisinsk biokjemi. Kommentaren skal besvares under «kommentarer» på linje 1 i preparat-fanen i resultatoppføring.  

 

Tolkning av Gram preparaat

Gram-positive bakterier (blåsvarte)

Kokker i hauger

stafylokokker

Kokker i kjeder og diploform

streptokokker, enterokokker, viridans streptokokker, pneumokokker

Stavbakterier (små)

pallisader

Listeria spp., Corynebacterium spp.

Stavmakterier (store ev. med sporer)

Clostridium spp. Listeria, Bacillus spp.

runde og ovale former,større enn bakterier,evnt med hyfer

Candida

Gram-negative bakterier (røde)

Diplo-kokker

Meningokokker, gonokokker, Moraxella catarrhalis

Stav-bakterier

Escherichia coli, Klebsiella spp., Proteus spp., andre Enterobacterales, Pseudomonas spp. Acinetobacter spp., Bacteroides spp., Haemophilus influenzae

spiralsnodde staver

Campylobacter

 

Besvarelse av mikroskopi

 

Mikroskopifunn kan besvares under «beskrivelse» i preparat-fanen i resultatoppføring, som vist på bildet under. Under beskrivelse kan man legge til så mange rader man ønsker

Mikroskopiresultatet kan foreløpig verifiseres for å gjøre det tilgjengelig for rekvirent.

 

Dersom preparatet domineres av en mikrobe som ikke gjenfinnes i vekst skal lege informeres for vurdering.

 

 

download