Hensikt
Sikre at NEQAS (SLP) prøver som MM mottar blir behandlet riktig og innenfor oppgitt tidsfrist.
Omfang
Månedlig utsendelse
Grunnlagsinformasjon
Historikk
MM har siden 2014 vært med i NEQAS AST (Antimicrobial Susceptibility Testing) programmet. Fra 2025 er MM også påmeldt generell bakteriologi (identifikasjon).
Arbeidsbeskrivelse
Ansvar
Faggruppe 1, bakteriologi har ansvar for administrasjon av Neqas AST, ID og MRSA.
Tildelt bioingeniør er ansvarlig for arbeid med, samt besvarelse av Neqas AST og ID.
Fagbioingeniør på faggruppe 1 og 2 er ansvarlig for rapportskriving på prøver med materialgrupper som faller inn under ansvarsområde.
Faggruppe genteknologi er ansvarlig for rapportskriving for MRSA.
HMS/sikkerhetsinformasjon
Regler for god laboratoriepraksis gjelder.
Referanse
Gjeldende brytningspunkt fra NordicAST
ARBEIDETS GANG
Prøvemateriale
Prøvene kommer på glass som frysetørret materiale.
Fremgangsmåte/Utførelse av analysen
Registering og utsåing
· Se dokumentet SLP og passord.xlsx for oversikt over hvem som har ansvar for aktuell forsendelse.
o 2 AST (Antimicrobial susceptibility) prøver kommer månedlig.
o 3 ID (general bakteriology) prøver kommer månedlig.
o 4 Mycologi prøver kommer i 3 ganger per år
o 2 MRSA kommer 4 ganger per år. Person ansvarlig for AST og ID tar også ansvar for utførelse og besvarelse av MRSA. Se fremgangsmåte for dette under «Ekstern kvalitetskontroll» (bakgrunn) i ALM-MM-PCR; Hurtigtest av MRSA, GeneXpert (Ikke tilgjengelig).
· Signer og dater forsendelsesskjema ved mottak.
· Registrer prøver i rekvisisjonsoppføring i Beaker:
o Rekvirent: HNT, Levanger Sh., Avdeling for laboratoriemedisin, Sammenlignende laboratorieprøving/Ekstern kvalitetsvurdering (SLP/EKV) {Ikkebet} {IkkeHP} HP-ID:1235000022
Pasientnavn: Neqas, UK
o Velg aktuell analyse for isolatet (aerob, anaerob, salmonella dyrkning, tarmpatogene bakterier etc.) og oppgitt prøvemateriale. ID-prøvene skal sås ut fra klinikk, så benytt valg av medier ALM-MM-Mottak; Valg av medier ved utsåing av bakteriologiske prøver for å vurdere hvilke analyser som skal bestilles (for fæcesprøver på ID følges ALM-MM-Fæces; Vurdering, innlapping og primærutsæd av fæcesprøver. Det er kun nødvendig å kjøre bakt.panel på BD-max. Fæcesprøver på ID leveres til fæcesplass for normal prøvegang.
o Legg inn prøvenummer i forordningskommentar knyttet til respektiv analyse. Skriv også oppgitt isolat for AST og oppgitt klinikk for ID og Mykologi.
(Tips: alle aktuelle analyser knyttet til en forsendelse kan legges til i samme rekvisisjonsoppføring.)
o Scan inn forsendelsesskjema i rekvisisjonsoppføring.
o I oppsettsbenk: For AST-prøver velges agar som man forventer at oppgitt isolat skal vokse på. For ID-prøver velges oppsett ut fra klinikk, som en vanlig pasientprøve, med unntak av direkte grampreparat. For Mykologi velges to sabouradskåler som merkes 29°C og 36°C.
· Utsåing:
Utsåing gjøres i sikkerhetskabinett, klasse 2. Metallforseglingen på toppen av glasset brytes av med en pinsett. Sprit av gummitoppen og tilsett 1ml buljong med sprøyte. Benytt glukosebuljong for aerobe bakterier og anaerobbuljong for anaerobe bakterier. Bland godt. La løsningen stå i 5 min. Benytt en steril pipette og overfør 1 dråpe av løsningen på dyrkningsmedium før utsæd med øse. Inkuber prøvene etter ordinære rutiner. Skåler til mykologiprøver skal forsegles med elektrikertape før inkubasjon.
· Logg inn på UK Neqas sine hjemmesider. Innloggingsinformasjon finnes i SLP og passord.xlsx
Du kommer til følgende bilde:
For AST: Informasjon om hvilke antibiotika som er aktuelt å teste for hvert isolat ligger i resultatregistreringsbildet.
Gå på linja UK NEQAS for Antimicrobial susceptibility og velg i rullegardinmenyen aktuelt distribusjonsnummer og trykk på Result.
Gå til blank form og print ut.
Du får nå ut et arbeidsark tilsvarende det på nettet.
Videre arbeid
· FOR AST: Vi tester de antibiotika vi har tilgjengelig som står på skjemaet til Neqas. Spesialbioingeniør på faggruppe 1 har fullstendig oversikt over tilgjengelige antibiotika dersom man har behov for hjelp. Fortrinnsvis tester og rapporterer vi alltid lappediffusjon dersom det finnes brytningspunkt for dette i NordicAST. Dersom det kun eksisterer brytningspunkt for MIC, tester og rapporterer vi gradienttest. Dersom vi ikke har etterspurt antibiotika for lappediffusjon, men vi har gradienttest, testes og rapporteres dette. En må også vurdere om midlene det spørres om er relevante i forhold til problemstillingen. Eksempel: dersom brytningspunkt kun gjelder UVI og vi har annet prøvemateriale, så rapporterer vi ikke dette i besvarelsen. OBS! Sjekk i informasjon om isolatet hvorvidt det er spesielle forhold man skal ta hensyn til ved oppsett eller vurdering av resultat, f.eks. at topikale brytningspunkt skal benyttes, eller at brytningspunkt for ukomplisert UVI skal benyttes.
Legg opp arbeidet slik at du får utført avlesninger dagen etter at du har satt opp følsomhetsbestemmelse. Alternativt kan det oppbevares i kjøleskap. Frist for innsendelse står oppført på medfølgende skjema. Utfør alltid følsomhetsbestemmelse på dagsfersk kultur.
· FOR ID: Vurder patogene funn etter våre vurderingsprosedyrer. Alle identifikasjonstester vi har tilgjengelig skal benyttes. Eksempler på dette er at S.aureus settes opp både med malditof og agglutinasjonstest, og positiv fæces PCR på bakterier som vi har medier til å dyrke frem skal identifiseres med malditof.
· FOR MYKOLOGI: Det er kun identifikasjon med malditof som er nødvendig. Benytt modulen «Filamentous fungi» på Sirius one. Isolatene skal IKKE fryses. Husk å tape skåler.
· All bakterie- og gjærsoppisolater fryses i -80°C, i egne frysbokser. Frysskjema finnes på Teams: Frysskjema NEQAS bokstype_4.xlsx
· Skåler oppbevares i kjøleskap inntil verifisering
Svarrapportering
FOR AST:
Tolkning dobbeltsjekkes alltid mot NordicAST. Slik kan vi også oppdage om det er uoverensstemmelse med tolkningsregler i Beaker.
Under «Guideline» legger vi inn «Eucast». Under «Method used routinely» velger vi standard metode for vårt laboratorium for gitt isolat. Dette vil i de fleste tilfeller være Disk diffusjon. Dersom vi i tillegg rapporterer antibiotika testet med en annen metode enn det vi har valgt som «default» kan vi velge dette bak aktuelt middel, slik som for Levofloxacin på eksempel over.
Under disk diffusjon rapporterer vi konsentrasjon på antibiotikalappene og sonediameter. For MIC rapporterer vi høyeste konsentrasjon på gradienttesten under «breakpoint concentration» og MIC-resultat under «MIC».
«Test result»: Her rapporterer vi det samme som «reported result».
Vi tar ikke hensyn til lokale utrapporteringsrutiner med M1, M2 etc, så alle resultat som har brytningspunkt mot spesifikk stamme og prøvemateriale skal legges inn med følsomhetskategori.
For brytningspunkt i parentes: Dersom våre rutineprosedyrer sier at vi ikke skal angi SIR-kategori i svarrapportering velger vi «not examined» under «test result» og «reported result». Dersom prosedyre sier at vi skal angi SIR-kategori med en kommentar, angir vi SIR og legger inn kommentar om at vi benytter kommentar for gitt isolat-antibiotika kombinasjon under «Final page».
Spesielle hensyn:
· Ved påvist induserbar klindamycinresistens: Under «reported result» velges «susceptible (dissociated R)»
· Vurdering/testing av ESBL hos Enterobacterales/Acinetobacter/Pseudomonas:
o Med ESBL menes ESBL-A. Dersom screeningsmidler ikke oppfyller kriterier kan disse besvares negativ. Dersom screeningsmidler oppfyller kriterier testes ESBL-A og M.
o Carba: Dersom screeningsmidler ikke oppfyller kriterier kan disse besvares negativ. Dersom screeningsmidler oppfyller kriterier testes isolat for karbapenemase. Se ALM-MM-Id; Karbapenemasetest O.N.K.V.I Resist-5. Om testen er negativ besvares Carba negativ i skjemaet, selv om vi rutinemessig ikke kan utelukke andre karbapenemaser.
FOR ID:
Under «Method» velger vi MALDI-ToF (bruker) for malditofresultat, «Molecular» for PCR og «Conventional tests» for alle andre tester. Legg inn instrument eller testnavn i kommentarfeltet. Velg aktuelt mikrobenavn som testen gir i «Result»-feltet. Legg inn svar som gis til rekvirent i «Overall result».
Under «Referral» velger vi «refer» dersom vi ville videresendt isolatet for videre undersøkelse.
FOR MYKOLOGI:
Malditof har en del begrensinger for identifikasjon av dermatofytter.
Under «First pathogen» velges det nærmeste man kommer endelig identifikasjon på Malditof. Under «Comment» legges eventuell kommentar til resultat, f.eks. begrensning i vår metode. Konferer med faggruppe 1 for endelig besvarelse.
Videre gang:
· Ta kontakt med aktuell fagbioingeniør eller spesialbioingeniør ved spørsmål angående oppsett eller besvarelse.
· På «final page» skal dato for når vi mottok prøven legges inn.
· Trykk submit result når distribusjonen er klar for innlevering
· Skriv ut utfylte skjema i nettleser ved å høyreklikke på registreringsbildene. Scan inn i Beaker under rekvisisjonsoppføring.
· Verifiser svar i Beaker
· Legg inn all etterspurt informasjon i SLP og passord.xlsx
OBS! MRSA har egen fane.