Fagbioingeniør faggruppe II har ansvar for vedlikehold av
denne prosedyren.
Alle som sender/sår ut fæcesprøver har ansvar for å følge denne prosedyren.
Selenitt er generelt kreftfremkallende, og kan gi fosterskade. Bruk derfor hansker, og jobb i sikkerhetsbenk. Fæcesprøver skal såes ut i sikkerhetsbenk.
Indikasjon for dyrkning av fæcesprøver ved primærdiagnostikk er mistanke om bakteriell gastroenteritt eller enterokolitt.
Standard dyrkningsanalyse omfatter dyrkning for å påvise Salmonella, Campylobacter, Yersinia og Shigella. De to førstnevnte er de vanligste årsakene til bakteriell gastroenteritt i Norge.
Analyse med tanke på å avdekke andre tarmpatogene bakterier kan være aktuelt ved spesielle kliniske opplysninger (se tabell under) eller ved ønske fra rekvirent.
Se ellers prosedyrer for de ulike fæcesanalysene.
Kommentaren BEGDIA skal benyttes når prøven KUN er dyrket ved SL. Dvs når den ikke er/har vært sendt til SOH innenfor de siste 3 månedene. (Nytt funn er definert som >3 måneder). Sjekk historikk hos pasient. Sending av slike analyser, nevnt i tabell(er) under er såkalte helanalyser, det er opp til legene ved SOH og ev supplere us jfr kliniske opplysninger på prøver videresendt fra SL.
NB HUSK: At alle prøver som videresendes til SOH skal ha med en kommentar i lab. kommentarfeltet dersom det er utført dyrkning og/eller C. difficile us. ved SL.
Tabell 1.0 viser spesielle kriterier for sending til SOH:
|
Klinikk/spesielle opplysninger |
Dyrkes ved SL |
Sendes SOH |
|
Ved opplysninger om langvarig diaré (>2uker) hos eldre i sykehjem/sykehus og hos immunsupprimerte pasienter. NB se kriterier ved dyrkning: Vær spesielt obs på prøver med spesielle kliniske opplysninger: |
JA |
JA. |
|
For barn under skolealder (< 5 år), uavhengig av klinikk. |
NEI |
JA |
|
Dersom tidligere KUN dyrket ved Levanger og kommentaren BEGDIA. |
NEI |
JA |
Se også prosedyre for sending av slike prøver: ALM-MM-Prøvemottak; Rekvirering og sending av prøver til SOH
Tabell 1.1 Viser oversikt over hva som skal sendes og hva som utføres ved SL:
|
AKTUELLE AGENS |
KLINIKK |
PROSEDYRE |
MEDIUM |
|
EPEC/ETEC Enteropatogene E.coli |
Prøver med kliniske opplysninger om diaré ved opplysninger om reisanamnese i utlandet utenfor Europa skal videresendes SOH for ETEC/EPEC-us. |
SOH |
Cary Blair**) |
|
EIEC Enteroinvasive E.coli |
EIEC er enteroinvasive E. coli som er nært beslektet med Shigella flexneri og S. Sonnei. Vanligvis mild diaré, men enkelte pasienter kan få dysenteriliknende bilde med pussholdig, av og til blodig diaré, kraftige abdominalsmerter og feber. |
SOH intern sendeprøve. |
Cary Blair**) |
|
EHEC Enterohemorragiske E.coli |
Prøver med følgende kliniske opplysninger skal videresendes SOH for EHEC-us: -Mistanke om hemolytisk-uremisk syndrom (HUS) -Alle med blodig diaré/hemoragisk kolitt - Diaré hos barn under skolealder (< 5 år), Langvarig diaré (> 2 uker) hos eldre i sykehjem/sykehus, og hos immunsuprimerte pasienter |
SOH intern sendeprøve. |
Cary Blair**) |
|
Parasitter (egg, cyster) |
|
SOH intern sendeprøve. |
Uten tilsetning |
|
NORO-virus |
|
SOH intern sendeprøve. |
Uten tilsetning |
|
Clostridioides difficile toksin |
Diaré som følge av antibiotikabehandling. |
Utføres ved SL |
Uten tilsetning |
|
Salmonella spp., Yersinia spp., Shigella spp., og Campylobacter spp. |
|
Utføres ved SL |
Cary Blair**) |
|
Rota-og Adeno-virus |
Hos barn (opptil 7 år) og eldre>65 år |
SOH Intern sendeprøve |
Uten tilsetning* |
v *Glass uten tilsetting i rom temperatur kan benyttes dersom transport <1 time. Dette vil stort sett gjelde for pasienter som er inneliggende på sykehuset Levanger, og på prøver som blir bringt laboratoriet rett etter prøvetaking. Ved utsæd etter >1 t må prøven oppbevares i kjøleskap (inntil 24 t).
v **Cary Blair transportmedium dersom transport i rom temperatur >1 time. Ved utsæd etter >24 t må prøven oppbevares i kjøleskap (inntil 48 t).
v For klargjøring og sending av disse prøvene se under kapittel: Svarrapportering.
Vær også obs på kliniske opplysninger om reiseanamnese fra følgende regioner:
Tabell 1.2; Viser en oversikt over spesielle reiseanamneser
|
Reiseanamnese* |
|
Opphold i Sørøst-Asia |
|
Opphold i Sør-Afrika |
|
Opphold i Karibia |
|
Bading i f.eks brakkvann |
|
Spist sjømat fra tropiske områder |
*For en oversikt over hvilke land som er aktuelle her; se under relatert.
Aktuelle agens her kan være; Vibrio spp, Shewanella spp, Aeromonas spp og Plesiomonas shigelloides.
Disse agens kan/vil vokse på XLD og CIN-agar, som er oppgitt i tabell 1.3, se under.
Tabell 1.3: Viser valg av medier og inkubering:
|
KLINIKK/MIKROBE |
XLD, 35°C |
CIN, 29°C |
*CCDA 42°C, mikroaerofilt |
SEL-bulj.,35°C |
SEL-bulj.,22°C |
|
Patogene tarmbakt. |
X |
X |
X |
X |
X |
|
Kontrollprøver til tidligere positive prøver: |
|||||
|
Salmonella/Shigella ktr*) |
X |
X |
X |
X |
X |
|
Campylobacter ktr*) |
X |
X |
X |
X |
X |
|
Yersinia ktr*) |
X |
X |
X |
X |
X |
*) Ved kontrollprøver til tidligere positive prøver skal
øvrige patogene tarmbakterier tas med.
*) Ved spesielle kliniske opplysninger skal CCDA-agar også
dyrkes ved 35 °C.
Se under: Spesielle kliniske opplysninger
Tabell 1.4; Viser spesielle forhold vedr. godkjenning av rekvisisjon og prøvemateriale:
|
l |
Kontroller at navn og fødselsdata på rekvisisjon og prøve stemmer overens. |
|
l |
Bioingeniør som analyserer fæcesprøver, skal gå gjennom rekvisisjonene før/etter innregistrering. |
|
l |
Bioingeniør vurderer rekvisisjon i henhold til rekvirerte us. og
kliniske opplysninger. Hvis klin. opplysninger mangler, |
|
l |
Alle prøvekommentarer som kan legges inn når prøven registreres, legges i rekvisisjonskommentar feltet. |
|
l |
Når mottatt fæcesprøve er Rekvirert i ROS som u.s: Annet, og klinikk tilsier tarmpatogene: 1. Legg til prosedyre; Diaréfremkallende agens. 2.
Gå deretter til resultatregistrering, besvar Annet som utført. |
|
l |
Dersom det er mottatt prøver på Cary Blair der væsken er tømt ut, skal prøven avbrytes med kommentaren; 510736 Analysen kan ikke utføres. Se rekvisisjonskommentar for utfyllende informasjon. Legg til: Transportmedium er fjernet før tilsetning av fæcesprøve. Vennligst send inn ny prøve på transportmedium. Se for øvrig vår prøvetakingsveileder. |
Ved mottatt fæcesprøver sendt på glass uten tilsetning fra primærhelsetjenesten (og det er rekvirert patogene tarmbakterier), legg til kommentaren:
.FGUP: Fæcesprøve sendt på glass uten preservering. Kan gi falsk negativ dyrkning. Bør sendes på Cary-Blair medium.
Prøver uten tilsetning:
Er prøven ≥2 dager såes prøven ut uten kommentar.
Er prøven ≥ 3 dager skal den ikke såes ut. Avbrytes med: Avbrytelsesårsak 510736
Legg til kommentarene:
v .TRA: Transporttid over 3 døgn kan føre til falsk negativ dyrkning
v .NYPA: Ny prøve anbefales
i rekvisisjonsoppføring under fanen rekv.kommentar.
Prøver med tilsetning:
Er prøven ≥ 3 dager såes prøven ut, ta med følgende kommentar:
v .TRA: Transporttid over 3 døgn kan føre til falsk negativ dyrkning
v .NYPA: Ny prøve anbefales.
Er prøven > 4 dager eller eldre skal den ikke sås ut. Avbrytes med: Avbrytelsesårsak 510736
Legg til kommentarene:
v Legges inn manuelt: Mottatt prøve har transporttid over 4 døgn. Dyrkning kan derfor ikke utføres.
v .NYPA: Ny prøve anbefales.
i rekvisisjonsoppføring under fanen rekv.kommentar.
Clostridioides difficile
Se: ALM-MM-PCR; Påvisning av Clostridioides difficile toksin B (tcdB) BD MAX (Ikke tilgjengelig)
Skåler og buljonger som skal benyttes ved utsæd av fæcesprøver:
1 stk XLD-agar
1 stk CIN-agar
1 stk CCDA-agar
Selenittbuljong 2 stk.
Alle skåler skal romtempereres før utsåing/bruk.
Selenittbuljong oppbevares i romtemperatur og er klar til bruk.
Ved opplysning om langvarig diaré (>2 uker) hos: eldre i sykehjem/sykehus og hos immunsupprimerte pasienter.
Fæcesprøve SKAL da såes ut på 2 CCDA-skåler. For å kunne inkubere i 2 ulike temperaturer.
Immunsupprimerte – betegnelse benyttet om en person med nedsatt motstandskraft mot sykdommer av ulike årsaker, for eks.:
v
Gravide. (Er ikke def. som sykdom, men pga at graviditet er en
spesiell situasjon
hvor infeksjoner krever stor oppmerksomhet og detaljert oppfølging av
mor og foster, og kan derfor representere en diagnostisk utfordring.)
v
Svært underernært eller de med anoreksi,
malign sykdom eller annen fremskreden kronisk sykdom
v Behandling med cytostatika eller steroider i høy dose over et lengre tidsrom, immunsuppresjon
v Lavt granulocytt tall uansett årsak
v Har fått diagnosen AIDS etter gjeldende definisjon
Inkubering (husk internkontroll):
v
Skålene settes sammen med GENbox mikroaerofile konvolutter
i egne kolber/bokser og inkuberes ved 42°C.
v
For dyrkning i 35 °C:
Skål settes sammen med GeNbox-mikroaerofile
konvolutter i egne kolber/bokser, husk; skriv på agar 35 °C,
inkuberes ved 35°C, kolbe settes
i skap sammen med salmonella dyrkning.
v Inkuberes i 2 døgn.
Usikkerhetsbidrag, feilkilder og interferens
For lang transporttid kan føre til at bl.a Shigella-/ Campylobacter- bakterier i prøven dør.
Se også under de enkelte fæces prosedyrene for usikkerhetsbidrag, feilkilder og interferens.
Utsåing av fæces skal utføres i sikkerhetsskap iført gul smittefrakk og hansker.
|
1. |
Lapp alle skåler og rør med etiketter. |
|
2. |
Fæcesprøver som også skal til parasitt, NORO virus eller eventuelt andre undersøkelser som ikke gjøres ved vår avdeling, sås ut så raskt som mulig, slik at prøven(e) kan sendes SOH så fort som mulig. |
|
3. |
Cary Blair glasset blandes godt (eventuelt på vortexmikser) før utsæd for å få en jevn suspensjon. |
|
4. |
Drypp en dråpe av suspensjon på hver skål og spre med øse slik at vi oppnår enkeltkolonier. |
|
5. |
Tilsett ca 0.5 ml suspensjon til hvert av 2 selenitt-rør. |
v CIN-skåler settes i stativ med hette over og inkuberes ved 28°C.
v XLD-skåler settes i stativ med hette over og inkuberes ved 35°C.
v Selenittbuljong settes i stativ og inkuberes sammen med XLD-skålene.
v Den andre selenittbuljongen inkuberes ved 22°C (romtemperatur).
v CCDA-skåler settes i en kolbe og pakkes umiddelbart med GenBox mikroaerofilt. Inkuberes ved 42°C. Husk internkontroll.
Se under de enkelte fæcesprosedyrene.
ALM-MM-Admin; Svarrapportering ved Lab. for medisinsk mikrobiologi.
Sendeprøver til St. Olavs Hospital se: ALM-MM-Mottak; Sending av prøver