Arbeidsbeskrivelse

ANSVAR

Seksjonsleder på blodbanken i samarbeid med den fagbioingeniør som er delegert ansvaret for laboratorie-analysene på blodbanken er ansvarlig for at teknikken og reagensene som brukes er validert og godkjent av norske helsemyndigheer.Fagbioingeniør er ansvarlig for at prosedyren til enhver tid er oppdatert.

HMS/sikkerhetsinformasjon

Preserveringsvæske er 0.1% NaN3. Alle pasientprøver behandles som potensiell infeksiøse.

ARBEIDETS GANG

Prøvematerialet og bearbeidelse av dette

EDTA-blod fra pasienten.

Reagenser og klargjøring av disse

PEG 4000 20 % solution, art.nr. K-43110, produsert av Essange Reagents, levert av Dianova AS. Bestilles etter behov. Reagenset skal ha romtemperatur før det brukes.
Hvis det er utfellinger eller blakking i reagenset, kan dette være tegn på bakteriell kontaminasjon, og reagenset brukes ikke.

ID-Coombs Anti IgG. Produkt-Id.: 50540, art.nr. 004025, produsert av BioRad, levert av Norsk Labex 

For plassering av reagenser, se egen reagensoversikt.

Analyseutstyr og klargjøring av disse

Cellevaskerør 12x75 mm levert av WWR.
Engangs plastpipette, felles leveranse til sentrallab.
DiaCent bordsentrifuge, levert av Norsk Labex, innstilt på riktig hastighet og tid.
ID-Inkubator, produsert av DiaMed, levert av Norsk Labex, innstilt på riktig temperatur.
ID-centrifuge, produsert av DiaMed, levert av Norsk Labex, innstilt på riktig hastighet og tid.

Feilkilder og interferens

Metoden er tidkrevende og omfattende, så den er ikke egnet som vaktarbeid. Det er en forutsetning å ha kjennskap til tidligere transfusjoner, da det kan oppstå partielle reaksjoner i kontrollreaksjonen med egne erytrocytter hvis det finnes alloantistoffer i plasma rettet mot blodgiverantigener. Det er viktig å være klar over at antistoffet fortynnes ved bruk av PEG, dette kan føre til at vi "mister" svake antistoffer. 

Fremgangsmåte/Utførelse av analysen

• Analysen bestilles i Beaker og IH-Com (Identifisering IAT). Kort tilordnes i IH-Com
• EDTA-glasset fra pasienten sentrifugeres og plasma pipetteres over i et plastglass merket med pasientens prøvenr., navn og fødselsnr.
• 1 ml pakkede (uvaskede) blodlegemer fra pasienten blandes med 1 ml EDTA-plasma og 1 ml PEG (hvis det er lite prøvemengde kan vi bruke halv mengde
• Glasset settes i stativ i ID-Inkubator fra DiaMed og inkuberes ved 37˚ i 15 minutter
• Sentrifuger glasset og pipetter over supernatanten i et nytt glass
• Det kan nå settes opp identifisering med LIAT på vanlig måte, se prosedyre: ALM-BB-Lab; Blodtypeantistoff, Identifisering med gelkort-teknikk, men vi bruker supernatanten i stedet for pasientens plasma
• Hvis vi får et reaksjonsmønster, er det ikke nødvendig med gjentatt adsorpsjon
• Hvis det er partiell reaksjon i brønnen med egne celler, skal mangel på reaksjon i de andre brønnene tas med forbehold
• Hvis det fortsatt er uspesifikke reaksjoner, gjentas prosessen. Supernatant blandes med like deler PEG og uvaskede blodlegemer fra pasienten, inkuberes, sentrifugeres og pipetteres av på nytt. Vi gjentar aldri prosessen mer enn en gang, fordi et eventuelt antistoff da blir så fortynnet at vi kan "miste" det
• Den nye supernatanten brukes til nytt oppsett med identifisering med LIAT
• Supernatanten kan også brukes til oppsett av utvidet forlik på gelkort. Se prosedyre: ALM-BB-Vakt; Utvidet forlik
• Supernatanten må brukes i løpet av 1 døgn etter at den er laget, fordi det kan oppstå presipitater av protein. Hvis det er presipitater i blandingen, må den kastes

Det bør ikke brukes PEG-behandlet plasma til utvidet forlik hvis det er negative celler ved identifisering i Liss/Coombsteknikk.

Det skal ikke brukes PEG-behandlet plasma til utvidet forlik hvis pasienten har fått transfusjon i løpet av de siste 120 dager.

Avlesing

Negative reaksjoner: Cellene legger seg som en knapp i bunnen av gelen.

Godkjenning av svar

Alle svar avleses på ID-Reader og legges inn i Beaker, se prosedyre ALM-BB-Vakt; Bruk av ID-Reader med IH-Com.

Skriv "PEG x1/2" i kommentarfeltet i IH-Com.

Svarrapportering

Se prosedyre: ALM-IKT; Svarrapportering, Beaker