ALM-MB-N-pre; Analysering av Osmolalitet i serum, plasma og urin. v. 2.0

Hensikt

Sikre riktig bruk av Fiske Micro-Osmometer Modell 210 til bestemmelse av osmolalitet i serum, plasma og urin og sikre optimal kvalitet på analysesvarene.

Omfang

Prosedyren omfatter alle ansatte ved Avdeling for Laboratoriemedisin, ALM, Sykehuset Namsos som har fått opplæring i bruk av Fiske Micro-Osmometer modell 210.

Oversikt over dette finnes i Kompetanseportalen. Se beskrivelse av kompetanseportalen: ALM-; Opplæring, oppdatering og vedlikehold/heving av kompetanse .

Grunnlagsinformasjon

HISTORIKK

ALM ved Sykehuset Namsos begynte med osmolalitet i rutinen fra mai 2009, instrument Fiske Micro-Osmometer Modell 210. Fra mai 2014 ble instrumentet online.

Referanseområdet ble endret 20.06.11. Det benyttes samme referanseområde som St. Olavs Hospital [5].

ANALYSEPRINSIPP OG TERMINOLOGI

Osmometerets måleprinsipp bygger på nedsetting av frysepunkt i vannholdige løsninger; frysepunktsdepresjon. Nedsetting av frysepunktet til under frysepunktsnivået til destillert vann, gir et direkte mål av den osmotiske konsentrasjonen. Destillert vann fryser ved 0ºC. En vannholdig løsning med osmolalitet på 1 osmol/kg fryser ved -1,858ºC. En løsnings frysepunkt avtar med økende konsentrasjon av oppløste partikler. I osmometeret underkjøles prøven til en temperatur langt under væskens frysepunkt. En elektrisk puls vil mekanisk sette i gang vibrasjon slik at prøven fryser. Ved isdannelsen avgir vannmolekylene bevegelsesenergi og varme frigjøres. Temperaturen stiger og vi oppnår likevekt mellom frigjøring av varme og isdannelse, dvs. frysepunktet. Frysepunktets temperatur måles og omregnes til mosmol/kg.

MEDISINSK INDIKASJON

s/p-osmolalitet: Se Osmolalitet (serum, plasma)

s/p-osmolalt gap: Se Osmolalt gap (serum,plasma)

Urin: Se Osmolalitet (urin)

REFERANSER

Hovedreferanse:

(1) Fiske Micro-Osmometer modell 210; User’s Guide 2105 Rev21 042710

Tilleggsreferanser:

(2) Pakningsvedlegg Standarder for osmometer 00AP05 Rev3

(3) Pakningsvedlegg Referanseløsning 3LP026 Rev11

(4) Medisinsk biokjemi-Brukerhåndbok; J. Stakkestad og A. Åsberg (2009)

(5) S.Mohammadzadeh. Etablering av referanseområdet for osmolalitet og osmolalt gap i serum, Bacheloroppgave ved HiST 2010.

Offisielle godkjenninger: Instrument, kontroll og standarder er CE merket etter IVD direktivet.

Interne valideringer: Valideringsrapport for begrenset validering av Osmolalitet på The Fiske® Micro-Osmometer Modell 210 (se under relatert) og ALM-MB-L; Valideringsrapport for osmolalitet utført på Fiske Micro-Osmometer modell 210.

METODENS YTELSE

Måleusikkerhet: ALM-MB-L; Valideringsrapport for osmolalitet utført på Fiske Micro-Osmometer modell 210.

Måleområde: 0 – 2000 mosmol/kg

Spesifisitet: Ikke oppgitt.

Sensitivitet (følsomhet): Ikke oppgitt.

Presisjon (reproduserbarhet): Se valideringsrapport ALM-MB-L; Valideringsrapport for osmolalitet utført på Fiske Micro-Osmometer modell 210.

Nøyaktighet: Se valideringsrapport ALM-MB-L; Valideringsrapport for osmolalitet utført på Fiske Micro-Osmometer modell 210.

Linearitet: Mindre enn ±1 % fra en rett linje mellom 0 og 200 mosmol/kg

Drift: Mindre enn 1 mosmol/kg per måned.

STANDARDER/KALIBRATORER

Calibration Standard 50 mosmol/kg (4019054)
Calibration Standard 850 mosmol /kg (4019055)
Referanseløsning 290 Clinitrol 10 x 2mL (4043623)

Reagensene bestilles i SAP, bestillingsnummer i parentes.
Leverandør: TRIOLAB
Telefon: 63 83 57 50

Oppbevares i romtemperatur i skuff under instrumentet. Holdbar til utløpsdato.

Kalibrering:

Instrumentet kalibreres ved behov dvs. når kontrollene går utenfor stoppegrensene eller etter tekniske endringer. Dette utføres av fagbioingeniør eller spesialbioingeniør tilhørende faggruppe 3.

• Før kalibrering utføres månedlig vedlikehold.

• Ta frem en ny ampulle av hver kalibrator.

• Når display viser Osmometer Ready, tykk på [NEXT] til [CALIB] vises på den venstre knappen. Trykk [CALIB] og 50 mosmol/kg Calibration vises i displayet.

• Pipetter 20 µl 50 mosmol/kg Calibration Standard i prøvekoppen, på samme måte som ved analysering av prøver.

• Trykk [START]. Apparatet analyserer kalibratoren og svaret kommer opp. Husk å tørke av målehodet med tampong mellom hver måling!

• Analyser 50 mosmol/kg Calibration Standard en gang til. Det kan inntreffe at man må analysere kalibratoren flere ganger før apparatet godkjenner denne.

• Når parallellene er godkjent av apparatet, vil 850 mosmol/kg calibration vises i displayet. Analyser 850 mosmol/kg kalibratoren, følg beskjedene på displayet. Dette gjentas til det kommer Calibration Complete, men ikke flere enn 6 ganger.

• Etter en kalibrering er utført, benyttes en kontroll fra leverandør, referanseløsning 290, for å sjekke at kalibreringa ble riktig. Denne skal ligge innen de grenser leverandør oppgir, + 2 mosmol/kg.

Blir det ved en feiltakelse trykket på Calibrate-tasten og apparatet ønsker å utføre en kalibrering, kan dette avbrytes vad å trykke [START] og [CALIB] en gang til.

INTERN KVALITETSKONTROLL

Det benyttes kontroller i to nivå. Disse analyseres hver dag instrumentet benyttes og de er gyldige i 24 timer.

OSMO 1: Autonorm Clin Chem Liq L-2
OSMO 2: BIO-RAD Liquicheck Urinalysis Control Level 2

Hver 14 dag overføres 1 mL nyåpnet/tint, godt blandet prøvemateriale til hver sitt 3 mL vacuette-rør (hvit topp). Disse merkes med egne etiketter som ligger i skuff under osmometeret. Kontrollene oppbevares i eget stativ på kjølerom K300.

EKSTERN KVALITETSKONTROLL

Det mottas SLP for s-osmolalitet og u-osmolalitet ALM-; Sammenlignende laboratorieprøvinger (SLP, ekstern kvalitetskontroll, ringtest) - håndtering og vurdering.

Arbeidsbeskrivelse

ANSVAR

Fagbioingeniør og spesialbioingeniør på faggruppe 3 har ansvar for instrumentet, prosedyren og bestilling av forbruksvarer.

Alle som er godkjent for å analysere på Fiske Micro-Osmometer Modell 210 er ansvarlig for at prosedyren blir fulgt.

HMS/sikkerhetsinformasjon

Alt biologisk materiale må behandles som potensielt smittefarlig. Se overordnet prosedyre Usterile engangshansker. Valg og bruk av usterile hansker og Håndhygiene

Oversikt over reagenser i Ecoonline.

ARBEIDETS GANG

Prøvematerialet og bearbeidelse av dette

s/p-osmolalitet:

Serum: Holdbar 3 døgn i romtemperatur

Plasma: Holdbar 1 døgn i romtemperatur

Osmolalt gap kan bestilles som en egen analyse i serum/plasma.

Se Osmolalitet (serum, plasma)

Urin:

For vurdering av nyrenes evne til konsentrering av urin tas 5 mL morgenurin, uten væskeinntak de siste 8 – 10 timer. Holdbar 1 døgn i romtemperatur/kjøleskap. Se Osmolalitet (urin)

Analyseutstyr og klargjøring av disse

• Fiske Micro- Osmometer modell 210. Bør stå i temperatur 18 – 35ºC og 5 – 80% relativ luftfuktighet (ikke kondens). Osmometeret skal alltid stå på. Er apparatet slått av, er AV/PÅ knappen bak på instrumentet. Oppvarmingstid er 30 minutter. Hver gang instrumentet blir slått på gjør instrumentet en selv-test. Den tar ca. 1 minutt. Det er viktig at denne selv-testen blir utført. Display viser Osmometer Ready når det er OK.

• Test kit (250 mikrokopper og tamponger) til måling, oppbevares i romtemperatur.

Bestilles i SAP, bestillingsnr.: 4013564.

• Eppendorf 20µl pipette.

Leverandør:
TRIOLAB
Telefon: 63 83 57 50

Feilkilder og interferens

• Luftboble i prøvetakingskoppen.

• Fordamping av prøvematerialet.

• Inntørket prøvemateriale på målehodet.

• Geleaktige prøver fryser dårlig

Interferens ikke oppgitt.

Fremgangsmåte/Utførelse av analysen

Har instrumentet ikke vært i bruk på ei stund står det Osmometer Ready, dato og klokkeslett på displayet. Trykk da på en av knappene det står [PRESS] over. Osmometer Ready lyser, og det står [TEST] (START) og [NEXT] over knappene. Instrumentet er da klart til bruk.

Analysering av prøver:

• Skann prøvens barkode

• Pipetter 20μl prøve/kontroll ved hjelp av pipette som står ved instrumentet.

• Tørk av utsiden på pipettespissen med en klut.

• Prøven settes ned mot bunnen av prøvekoppen. Pass på at det ikke blir luftbobler i bunnen av prøvekoppen. Det skal ikke være prøvemateriale på veggen av koppen. Er det blitt luftbobler, pipetterer på nytt i ny kopp.

• Hev prøvehodet til det stopper øverst i holderen. Senk prøvehodet forsiktig ned i prøvekoppen og trykk [TEST] (START). Osmometeret starter når nedkjølingen av prøven er fullført. Det høres så en bankelyd og prøven fryses. Når likevekt for frysepunktet er oppnådd høres en pipelyd og svaret kommer på displayet: Osmolality ××× mOsm/kg. Dette går automatisk over til Beaker. Hver pasientprøve analyseres 2 ganger, hvis forskjellen på svarene er mere enn 2% analyseres prøven en tredje gang.

• Svar godkjennes i Beaker.

• Løft opp prøvehodet til det stopper, sett en hvit tampong ned i den brukte prøvekoppen og senk prøvehodet forsiktig ned i tampongen. La det stå 2-3 sekunder for å tørke av spissen. Fjern prøvekoppen og instrumentet er klart til neste prøve.

Etter hver bruk:

Vask prøveproben med en tampong fuktet med dest. vann på samme måte som beskrevet over. Tørk deretter av med en tørr tampong. Når instrumentet ikke er i bruk, skal det alltid stå med en tom kopp i prøvekammeret. Denne brukes ved neste analysering.

Vedlikehold

Månedlig:

Fukt en tampong med dest. vann og sett i en prøvekopp. Prøveproben rengjøres ved å senke målehodet forsiktig ned i tampongen. Fukt deretter en tampong med sprit og utfør samme prosedyre. Denne prosedyren er viktig for å unngå at det bygger seg opp proteinbelegg på proben. Deretter fuktes ny tampong med dest. vann og samme prosedyre utføres. Tørk så proben med en tørr tampong.

Ved behov:

• Inspiser luftfiltrene på instrumentets underside og bakside for å forsikre at støv eller rusk ikke har samlet seg opp.

• Vask instrumentets utvendige overflater med varmt vann og såpe.

• Kjølekammeret kan tørkes forsiktig med tupfer og vann.

Vurdering av svar

Alle pasientprøver analyseres i paralleller, hvis svaret mellom parallellene er mere enn 2% analyseres prøven en tredje gang.

Resultat over øvre målegrense utgis som >850 mosmol/kg

REFERANSEOMRÅDER/BIOLOGISK VARIASJON