ALM-BB-Vakt; Feno- og K-typing på gelkort v. 4.8

Arbeidsbeskrivelse

FLYTSKJEMA

Eget flytskjema fra produsent finnes på arbeidsbenken.

ANSVAR

Seksjonsleder på blodbanken sammen med den fagbioingeniør som er delegert ansvaret for laboratorieanalysene er ansvarlig for at teknikken og reagensene som brukes er validert og godkjent av norske helsemyndigheter. Fagbioingeniør er ansvarlig for at prosedyren holdes oppdatert.

HMS/sikkerhetsinformasjon

Konserveringsmiddel er Natrium-Acid (Utvikler giftig gass i kontakt med syre).

Alle reagenser skal behandles som potensielt infeksiøse.

ARBEIDETS GANG

Prøvematerialet og bearbeidelse av dette

Vi bruker EDTA-blod. Blod tilsatt citrat, heparin eller CPD-A kan også brukes.

Reagenser og klargjøring av disse

DiaClon Rh-subgroups+K, Produkt-id.:50110 Ref.nr 002124 gelkort produsert av Biorad, levert av Norsk Labex.

Diluent 2, produsert av Biorad, levert av Norsk Labex, produkt-ID:05761, ref.nr 009260.

Diluent 2 Rack, produsert av Biorad, levert av Norsk Labex, ref. nr 009290.

Diluent PH 7 varenr. Tv 003, levert av Norsk Labex.

Alle reagenser skal ha romtemperatur når de brukes.

Analyseutstyr og klargjøring av disse

BioRad spesialsentrifuge for gelkort, levert av Norsk Labex.

Fremgangsmåte

Analysen etterbestilles i Beaker som Fenotypepakke ery (C, c, E, e, K).

Dersom den bestilles direkte i IH-Com heter den Subgroup+K i Levanger og Rh Feno + K i Namsos.

Analysering i IH 500: Se prosedyre ALM-BB-Vakt; IH-500, Bruk og vedlikehold.

Alle svar overføres til Beaker og verifiseres automatisk. Ingen kontroll-lesing er nødvendig.

Utførelse av analysen når analysen utføres manuelt

·         Tilordne kort på ID-Reader ifølge prosedyre ALM-BB-Vakt; Bruk av ID-Reader med IH-Com

·         Merk gelkortet med etikett fra IH-Com tilknyttet ID-Reader

·         Lag en 3-5% celleoppslemming av 500µl Diluent 2 og 25µl pakkede blodlegemer

·         Pipetter 10-12,5µl av cellesuspensjonen i hver av brønnene på gelkortet

·         Sentrifuger kortene i Dia-Med sentrifugen for kort (Innstilt på 10 min.)

·         Les av reaksjonene

Vurdering av svar

Positiv: Tilstedeværelse av antigen vil vise seg som ++++ til + reaksjon der blodlegemene ligger som et lokk oppå gelen eller er trukket nedover i gelen. ++++ til +++ reaksjon er positivt resultat.

Hvis vi får reaksjon som er + til ++ og negativ kontrollbrønn settes prøven opp på nytt på følgende måte:

·         Lag en 5% cellesuspensjon av 500µl ID-Diluent 1 og 25µl pakkede blodlegemer

·         Inkuber i 10 min. i romtemperatur

·         Tilsett 10-12,5µl blodlegemeoppslemming til brønnene i kortet, sentrifuger i 10 min. og les av

·         Tilstedeværelse av antigen vil nå vises med +++ til ++++ reaksjon

·         Hvis denne metoden gir + til ++ reaksjon, kan vi ikke konkludere. Vi må ta ny prøve eller sende prøven til St. Olav for genotyping

Negativ: Blodlegemene ligger som en knapp i bunnen av gelen.

Kontrollbrønnen skal alltid være negativ. Hvis kontrollbrønnen er positiv, vaskes blodlegemene i varm Diluent 2 eller varm Diluent Ph 7 og analysen settes opp på nytt som beskrevet under utførelse av analysen.
Hvis kontrollbrønnen fortsatt er positiv, kan det ikke konkluderes. Vi må ta ny prøve, evt. sende prøve til St. Olav for genotyping.

Registrering av svar

Resultat overføres til Beaker fra ID-Reader og IH500, og blir automatisk verifisert. Ingen kontroll-lesing er nødvendig.

Alle fenotypinger på blodgivere overføres til ProSang med rutine G016. Dette skal gå automatisk, men kan også utføres manuelt.

Fenotypinger på pasienter går ikke over i ProSang. De legges inn av blodbankpersonalet i tabell i P551 hvis vi besvarer et antistoff eller de kan legges inn i rutine P023.

Godkjenning av svar

Alle kort satt opp manuelt leses av på ID-Reader, se prosedyre ALM-BB-Vakt; Bruk av ID-Reader med IH-Com. Sjekk at konklusjonene ID-Reader foreslår er i samsvar med dine egne. Vi er kjent med at ID-Reader krever ++++ til +++ reaksjoner for å konkludere. Se under vurdering av svar.

Svarrapportering

Verifiserte svar kan hentes opp av interne rekvirenter i RoS.

Resultatene skrives ut på svarrapport og sendes til eksterne rekvirenter. Primærhelsetjenesten som er tilknyttet Midt-Norsk Helsenett får svar elektronisk overført.

Se prosedyre ALM-IKT; Svarrapportering, Beaker.