Levanger: Flytskjema fra leverandøren finnes på arbeidsbenken.
Seksjonsleder på blodbanken i samarbeid den fagbioingeniør som er delegert ansvar for laboratorieanalysene på blodbanken er ansvarlig for at teknikken og reagensene som brukes er validert og godkjent av norske helsemyndigheter. Fagbioingeniør er ansvarlig for at prosedyren til enhver tid er oppdatert.
Alle pasientprøver behandles som potensiell infeksiøse.
IgG og C3d rekvireres automatisk på alle pasienter med positiv DAT, unntatt barn ≤ 3 mnd.
Prøvematerialet og bearbeidelse av dette
Vi bruker helst EDTA-blod. Blod tilsatt citrat eller CPD-A kan også brukes. Glasset sentrifugeres og pakkede blodlegemer brukes.
Blod tatt i glass uten tilsetning kan brukes. Blodet bør da vaskes x1 før det oppslemmes med Diluent 2.
Prøver lagres ved 2-8 °C i minimum 1 uke.
Reagenser og klargjøring av disse
ID-Diluent 2, Produkt-ID:05761, ref.nr.:009260
Diluent PH-7 varenr. Tv 001, levert av Norsk Labex..
Gelkort DC-Screening II produsert av BioRad, levert av Norsk Labex. Art.nr.004851. Kort ID-nr.:50560
Reagensene skal ha romtemperatur før de brukes.
For oppbevaring av reagenser, se egen reagensoversikt.
Analyseutstyr og klargjøring av disse
Cellevaskerør 12x75 mm, levert av Tamro
ID-DiaCent, spesialsentrifuge for gelkort, produsert av BioRad, levert av Norsk Labex. Ferdig innstilt på riktig hastighet og tid.
Enkelte medikamenter kan gi falske positive reaksjoner.
Fremgangsmåte/Utførelse av analysen
For analysering på IH-500 (Levanger): Se prosedyre ALM-BB-Vakt; IH-500, Bruk og vedlikehold.
Manuelt oppsett:
• Tilordne kort på IH-Com tilknyttet ID-Reader ifølge prosedyre ALM-BB-Vakt; Bruk av ID-Reader med IH-Com
• Merk gelkortet med etikett fra skriver tilknyttet ID-Reader
• Lag en 0,8% cellesuspensjon av 1,0 ml Diluent 2 og 10 μl pakkede blodlegemer
• Tilsett 50 μl cellesuspensjon i hver av de 3 gelkortbrønnene
• Sentrifuger kortet i 10 minutter i ID-sentrifugen (ingen inkubering)
• Kort leses av på ID-Reader. Sjekk brønnene mot resultat i IH-Com. Velg Aksepter alle og Lagre
Godkjenning av svar
Resultatene overføres fra IH-Com til Beaker som Endelig verifisert. Resultat angis som Positiv eller Negativ. Styrkegraden legges automatisk til som en kommentar til komponentene.
Vi gjør ikke P538 på DAT eller IgG og C3d.
Hvis den negative kontrollen blir positiv, gjøres følgende:
• Vask de røde blodlegemene med varm(37°C) Diluent Ph7 eller varm Diluent 2
• Lag fortynning og sett opp monospesifikk DAT på nytt som beskrevet under ”Utførelse av analysen”.
Se prosedyre: ALM-IKT; Svarrapportering, Beaker
Å utføre en monospesifikk DAT korrekt med gelkortteknikk.
Prosedyren omfatter alle bioingeniører som er godkjent for å utføre analysen. Prosedyren beskriver forarbeid med prøven, oppsett og avlesning.
Vi har utført monospesifikk DAT siden 1990. De gelkortene som brukes i dag, har vært i bruk siden september 2004. Ved innføring av Beaker februar-21 endres analysenavnet til IgG og C3d.
En positiv DAT med polyspesifikt anti-humant globulin viser at røde blodlegemer in vivo er dekt med immunglobulin og/eller komplement. For å få et spesifikt reaksjonsmønster, benyttes et kort med monospesifikt antiglobulinreagens.
Kortet inneholder 6 brønner med monospesifikke AHG-reagenser. Hvert kort brukes til 2 pasienter. 2 brønner inneholder anti-IgG, 2 inneholder anti-C3d og 2 brønner brukes til negativ kontroll.
IgG og C3d utføres på pasienter med
positiv DAT eller positiv autokontroll ved identifisering. Det utføres ikke
på barn ≤ 3 mnd. Ved positiv DAT er det viktig å skille mellom de ulike
antiglobuliner for å finne ut hvilken type autoimmun hemolytisk anemi (AIHA)
det er snakk om.
Pasienter med auto-immun hemolytisk anemi av varmetype (WAIHA) har oftest
antistoffer av IgG-type på sine røde blodlegemer. Hos 24% av pasienter med
WAIHA finner vi i tillegg C3-komplement. Hos noen få pasienter (ca 7%) finner
vi bare C3 og i svært sjeldne tilfeller er IgA- og IgM-antistoffer tilstede.
Hos pasienter med hemolytisk anemi av kuldetype (CAD-Cold Agglutinin Disease) er det mest vanlig med komplement som dekker de røde cellene (IgM og/eller IgA finnes av og til).
Hovedreferanse: (1) Produsent BioRad`s produkt og arbeidsbeskrivelse. DiaMed-ID Micro Typing System.DC-Screening II, Produkt-ID:50560, ref.nr.: 004831
Tilleggsreferanser: (2) Opplysninger om direkte Coombs prøve i ”blåboka” (Immunologi og transfusjonslære-Statens helsetilsyn- 1995-utgave).
Offisielle godkjenninger: (1): Produsenten BioRad oppgir å være sertifisert etter ISO 9001:2000 og EN ISO 13435:2000 og oppgir å praktisere GMP. (1) har IVD-merke på reagensene.Reagensene er CE-merket.
Høring: Prosedyren har vært til høring hos alle som er godkjent for å utføre analysen.
Nyttig litteratur: Veileder for transfusjonstjenesten i Norge, utgitt av Helsedirektoratet utgave 7.3 2017 https://helsedirektoratet.no/retningslinjer/veileder-for-transfusjonstjenesten-i-norge
| Forfatter: |
Lene Johnsen Salberg (Overbioingeniør) |
|---|---|
| Godkjent av: |
Birgit Johanne Hoel Stubbe (Seksjonsleder) |
| Dokumentadministrator: | Tove Elisabeth Berg Vordal (Fagansvarlig bioingeniør) |
| Dokument-ID: | 4976 |
| Gyldig fra: | 27.09.2024 |
| Revisjonsfrist: | 26.09.2029 |
Flyttet punkt ang. positiv kontrollbrønn fra Ofte stilte spørsmål til Godkjenning av svar.
Prøver lagres ved 2-8 °C i minimum 1 uke.