Hensikt

Sikre at analysering av Hemoglobin (Hb) i blod, på Sysmex XN, gir et korrekt og optimalt svar til rekvirenten.

Omfang

Gjelder alle ansatte ved Avdeling for Laboratoriemedisin som er godkjent for å analysere prøver på Sysmex.

Grunnlagsinformasjon

HISTORIKK

Hemoglobin har blitt analysert på ulike instrumenter siden før 1970. Sysmex XN-1000 ble tatt i bruk i 2015. Sysmex fungerte som back-up-instrument for Cell-Dyn Sapphire, pluss at de fleste tilsendte prøver ble analysert her. 2019 ble CellDyn byttet ut med Sysmex XN-1500.

Sysmex XN-1500 fungerer som hovedinstrument for ferske prøver og som back-up for Sysmex XN-1000.

 

ANALYSEPRINSIPP OG TERMINOLOGI

Terminologi:

Hemoglobin er det oksygenbærende røde pigmentet i erytrocyttene. Det består av en proteindel (globin) og fire molekyler hem. Globindelen er bygget opp av to polypeptidkjeder som hver har et molekyl hem i en ”lomme”. Hemgruppene er kompliserte ringformede molekyler. Sentralt har de et jernatom (Fe²⁺) som binder oksygen reversibelt under oksygentransporten. Omtrent 97% av den totale hemoglobinmassen hos normale voksne er HbA, som har to alfa - og to betakjeder. Voksne har også noen få prosent HbA₂, som har to alfa – og to deltakjeder og litt føtalt hemoglobin, HbF, som består av to alfa – og to gammakjeder. Anemi defineres som b-hemoglobin under nedre referansegrense. Det er relativt store alders – og kjønnsforskjeller når det gjelder referanseområder for b-hemoglobin.

Prinsipp:

SLS – Hemoglobinmetode - (Sodium Lauryl Sulfate)

Hydrofobe grupper på SLS binder seg til globinmolekylet. Det oppstår en konfigurasjonsforandring. Toverdig jern (Fe ²⁺ ) oksideres til treverdig (Fe ³⁺).
Hydrofile grupper på SLS binder seg til jernet og danner SLS-Hb som måles fotometrisk ved 555 nm.

MEDISINSK INDIKASJON

Se Hb (Hemoglobin) (Blod)

REFERANSER

Hovedreferanse:	Sysmex brukermanual –22 (1)
Tilleggsreferanser:	Nasjonal brukerhåndbok medisinsk biokjemi –21 (2)
	Holdbarhet for hematologiske analyser ved Seksjon hematologi. AMB (SOH EQS 26842 v.3.5) (3)
Offisielle godkjenninger:	Leverandør er ISO-sertifisert 9001, Utstyr CE merket etter IVD direktivet. (4)
Interne verifiseringer:	ALM-MB-Hem; Validering av SYSMEX XN-1000 (Ikke tilgjengelig) og ALM-MB-Hem; Validering av Sysmex XN-1500

 

METODENS YTELSE

Måleusikkerhet:

Det blir beregnet gjennomsnittlig CV for instrumentet målt i kontrollblod i tre nivå. Hver annen måned (pga lotskifte) beregnes mean, CV og SD. Lagres i Teams.

Måleområde/Linearitet:

0,1– 26,0 g/dL

Nedre og øvre deteksjonsgrense:

0,1 –26,0 g/dL

Presisjon (reproduserbarheten) og nøyaktighet: 

Se ALM-MB-Hem; Validering av SYSMEX XN-1000 (Ikke tilgjengelig) og
ALM-MB-Hem; Validering av Sysmex XN-1500

STANDARDER/KALIBRATORER

Begge instrumentene kalibreres med XN CAL fra Sysmex. Dette gjøres hovedsakelig av Sysmex sine serviceingeniører når service blir utført. Kan unntaksvis utføres av  fagbioingeniør ved behov.

INTERN KVALITETSKONTROLL

Det benyttes tre kommersielle kontroller og pasientprøver som interne kvalitetskontroller.

Kommersielle kontroller fra Sysmex, brukes hver dag i 3 nivå.

-          XN Check Level 1

-          XN Check Level 2

-          XN Check Level 3

To nivå pr. instrument.

X-M - pasientmean over tid.

Tre pasientprøver samkjøres mellom instrumentene.

Se prosedyre ALM-MB; Sysmex XN

EKSTERN KVALITETSKONTROLL

Vi benytter kontroller fra NOKLUS og følger deres program for kontrollnivå og hyppighet.

Resultatene ligger i kvalitetssystemet EQS.

Henviser til prosedyre: ALM-; Sammenlignende laboratorieprøvinger (SLP, ekstern kvalitetskontroll, ringtest) - håndtering og vurdering

ANALYTISK KVALITET

Tillatt totalfeil (TEA): 5 %
Fastlagt etter en vurdering av analysens yteevne i forhold til de medisinsk behov

 

Arbeidsbeskrivelse

Kort oversikt over Hgb

●Prøvemateriale: EDTA-blod, Citratblod, Heparinblod
●Prøvevolum: 88 µL
●Standardpipettering. Ufortynnet.
●Metode på instrumentet: SLS – Hemoglobinmetode - (Sodium Lauryl Sulfate) fotometrisk.
●Betegnelse på instrumentet: Hgb
●Betegnelse i datasystemet: b-Hemoglobin
●Kalibratorer: XN CAL fra Sysmex
●Kontroller: XN Check Lav, Normal og Høy, pluss pasientprøver
●Reagenser: Cellpack DCL og Sulfolyser
●Benevning: g/dL
●Tekniske grenser: 0,1 – 26.0 g/dL

ANSVAR

Fagbioingeniør og /eller spesialbioingeniør er ansvarlig for at instrumentet fungerer og at prosedyren er oppdatert.

Den enkelte er ansvarlig for å gjøre seg kjent med prosedyren etter opplæring. Den enkelte skal også forsikre seg om at instrumentet er i orden iht prosedyrene før start av analysering.
Ansvarlig fra Medisinsk-teknisk avd.er oppført i Medusa

HMS/sikkerhetsinformasjon

Alle blodprøver skal behandles som en potensiell smittefare.
Reagenser: Henviser til  Ecoonline.no

OFTE STILTE SPØRSMÅL

Hvor lenge man må vente etter transfusjon før Hb kan kontrolleres? 
Svar: Minimum 15 min (Ref: Klinisk transfusjonshåndbok, Norsk forening for immunologi og transfusjonsmedisin; Den norske legeforening, 2017).

 

 

ARBEIDETS GANG

Spesielle forhold vedr. prøvetaking, prøvemateriale og forberedelse av pasient

Henviser til:
ALM-MB-pre; Blodprøvetaking av voksne og barn

Bruker fortrinnsvis EDTA- blod. Ved mistanke om kuldeantistoff forvarmes prøven til 37 grader. Heparin og Citratblod kan også brukes. Husk fortynningsfaktor ved bruk av Citrat-blod. Se Beregning av svar.

Holdbarhet
Se Hb (Hemoglobin) (Blod) ³

Analyseutstyr og klargjøring av disse

Instrumentet klargjøres etter prosedyre ALM-MB; Sysmex XN

Reagenser

Produktdatablad for reagensene finnes på  Ecoonline.no

Leverandør: Sysmex Norge

Alle reagensene kommer klar til bruk, og oppbevares i romtemperatur

•         Sulfolyser:

Holdbarhet:

Uåpnet: Til utløpsdato

På instrumentet: 90 dager

Volum: 5L

•         Cellpack DCL:

Holdbarhet:

Uåpnet: Til utløpsdato

På instrumentet: 60 dager

Volum: 10 L

Feilkilder og interferens

•         Preanalytiske feilkilder

o   Kroppsstilling. Konsentrasjonen av høymolekylære stoffer øker med inntil 10 % fra liggende til stående stilling

o   Dehydrert pasient

o   Langvarig stase

o   Ødematøs pasient – prøven kan bli fortynnet med vevsvæske

o   Koagel i prøven

•         Interfererende substanser som evt. kan gi falsk for høy Hb:

o   plateklumper

o   lyseresistente røde

o   lipemi/chylomicrons

o   ekstremt høy bilirubin

 

Fremgangsmåte/Utførelse av analysen

Se prosedyre: ALM-MB; Sysmex XN

 

Beregning av svar

Svarene fra analyseinstrumentet gis direkte ut.

∙ Ved bruk av PT-INR-glass multipliseres Hb-resultatet med 1,11.

∙ Ved bruk av SR-glass multipliseres Hb-resultatet med 1,25.

Se prosedyre: ALM-MB; Sysmex XN

REFERANSEOMRÅDER

Voksne:

Hentet fra SOH: Ref. området for voksne er funnet ved innkjøring av eget materiale (prøver fra 267 blodgivere) på Sysmex XN i 2015

Barn:

Barn: Aldrimer, M., et al., Population-based pediatric reference intervals for hematology, iron and transferrin. Scand J Clin Lab Invest, 2013. 73(3): p. 253-61

Se Hb (Hemoglobin) (Blod)

Oppfølgende tiltak i forbindelse med svar

Se
ALM-MB; Sysmex XN Resultathåndtering i EPU og
ALM-; Ringerutiner for Medisinsk biokjemi og Blodbank

 

 

 

Vurdering og godkjenning av svar

Svarene verifiseres i EPU og overføres direkte til Beaker.
Svar som ifølge verifiseringsreglene ikke blir autoverifisert, vurderes manuelt (se ALM-MB; Sysmex XN Resultathåndtering i EPU) og godkjennes i Beaker.

 

Autoverifiseringen er satt til å gjelde svar <8,0 og > 18,0 (kvinner) / 20,0 (menn). Svar utenfor disse grensene og/eller alarm på en eller flere analyser i prøven, blir holdt tilbake for manuell vurdering.

 

Svarrapportering

Se
ALM-MB-IKT; Manuell overføring av prøvesvar fra analysemaskin til online-PC og
ALM-IKT; Svarrapportering, Beaker

 

Videre svarrapportering er etter Avdeling for laboratoriemedisin sine rutiner.