Seksjonsleder på blodbanken sammen med medisinsk faglig rådgiver SOH er ansvarlig for at teknikken og reagensene som brukes er validert og godkjent av norske helsemyndigheter. Den fagbioingeniør som har delegert ansvar for laboratorieanalysene på Levanger er ansvarlig for at prosedyren holdes oppdatert.
Konserveringsmiddel er NaN3 (Utvikler giftig gass i kontakt med syre).
Alle reagenser skal behandles som potensielt infeksiøse.
Prøvematerialet og bearbeidelse av dette
Vi bruker prøver tilsatt EDTA eller CPD-A. Citrat-blod kan også brukes.
For å oppnå best mulig resultater, skal det brukes ferske prøver (ikke eldre enn 2-3 dager).
Prøver lagres ved 2-8 °C i minimum 1 uke. Pilotglass fra blodgivere lagres til SAG-posens utløpsdato.
Reagenser og klargjøring av disse
Anti-A1 Absorbed, produkt-ID 50140, ref.nr. 001811.
ID-Diluent 1, produkt-ID 05761, ref.nr. 009160.
ID-Diluent 1 Rack, ref.nr. 009190.
Alle reagenser er produsert av BioRad og levert av Labex.
Alle reagenser skal ha romtemperatur før bruk.
Analyseutstyr og klargjøring av disse
ID-Centrifuge for gelkort, innstilt på riktig hastighet og tid, produsert av DiaMed, levert av Labex.
Engangspipetter, bestilles fra sentrallageret.
Banjo ID-Reader, levert av Labex.
Cellevaskerør, levert av VWR.
IH-500, produsert av BioRad, levert av Labex.
Bakteriell kontaminasjon kan gi falske negative eller positive reaksjoner.
Fibrin legger seg som et lokk over gelen og kan gi falske reaksjoner.
Bruk av andre fortynningsløsninger enn ID-Diluent 1 kan gi feil reaksjoner.
For svake eller for sterke cellesuspensjoner kan gi feil reaksjoner.
A1-typing ved nyregistrering og 1. gangs tapping av givere med blodtype A eller AB rekvireres automatisk i Beaker. Ved tidligere kjent A1 positiv, kan analysen slettes.
A1-typing av pasienter bestilles i Beaker via Prøveoppdatering.
For analysering på IH-500: ALM-BB-Vakt; IH-500, Bruk og vedlikehold.
Manuelt oppsett
• Finn positiv og negativ kontroll blant pilotglassene (negativ kontroll kan ikke være eldre enn 2-3 dager). Bland opp og sentrifuger
• Tilordne kort på ID-Reader, se prosedyre ALM-BB-Vakt; Bruk av ID-Reader med IH-Com
• Merk gelkortet med etikett fra ID-Reader
• Lag en 5 % cellesuspensjon av 0,5 ml ID-Diluent 1 og 25 µl pakkede blodlegemer eller 50 µl fullblod
• Løsningene inkuberes i romtemperatur i 10 minutter
• Tilsett 10-12,5 µl cellesuspensjon til de respektive brønner
• Sentrifuger kortet i 10 minutter i ID-sentrifugen
• Les av på ID-Reader. Sjekk brønnene mot resultat i IH-Com og velg Aksepter alle og Lagre
IH-Com oppgir kun styrkegrad på reaksjonene. Resultat må derfor vurderes ut fra tabellen under. Ved svake reaksjoner som kan tolkes som A1 negativ, endre resultat til – før resultat godkjennes i IH-Com. Slett deretter reflekstest «Test to review» fra Arbeidslisten, slik at resultat fra A1-typing sendes til Beaker.
Dersom det er vanskelig å konkludere A1-type, se Oppfølgende tiltak i forbindelse med svar.
Reaksjonsmønster for A-undergruppenes antigener (de mest vanlige er merket gult):
|
Undergrupper |
Anti-A |
Anti-A1 |
|
A1 |
++++ |
++ til ++++ |
|
A2 |
+++ til ++++ |
- til + |
|
Aint |
++++ |
++ til +++ |
|
A3 |
+ til +++* |
- |
|
Ax |
- til + |
- |
|
A1B |
++++ |
++ til ++++ |
|
A2B |
+++ til ++++ |
- til + |
|
A3B |
++ til ++++* |
- |
|
AxB |
- til + |
- |
* Doble populasjoner kan observeres i enkelte tilfeller og skal tolkes som positive.
Oppfølgende tiltak i forbindelse med svar
Dersom det er vanskelig å konkludere A1-type (DP eller reaksjonsstyrke i grenseland mellom 1+ og 2+), skal analysen settes opp i glass. Se prosedyre ALM-BB-Lab; A1-typing i glass.
Resultat blir Endelig verifisert i Beaker og angis som Positiv eller Negativ.
Hvis antigentypingen er rekvirert på pasient i forbindelse med identifisering av anti-A1, kan resultatet legges inn i Prosang i P551. Resultatet kan også legges inn i P023.
Resultatet på blodgivere overføres til Prosang når det er verifisert i Beaker. Hvis svaret må legges inn manuelt i Prosang, legges det inn i G026, omgang 1 og 2. Svaret legges inn som – eller + og må kontroll-leses av 2 personer.
Resultatet kan hentes opp i P386-fenotype umiddelbart. Vises ved søking i P330 først neste dag.
Se prosedyre ALM-IKT; Svarrapportering, Beaker.