Seksjonsleder på blodbanken i samarbeid med fagbioingeniør er ansvarlig for at den teknikken og de reagenser som brukes er validert og godkjent av norske helsemyndigheter. Den fagbioingeniør som er delegert ansvar for blodbankanalysene, er ansvarlig for at prosedyren er oppdatert.
Alle reagenser behandles som potensielt infeksiøse.
Spesielle forhold vedr. prøvetaking og forberedelse av pasient
Se prosedyre: ALM-MB-pre; Blodprøvetaking av voksne og barn
Prøvematerialet og bearbeidelse av dette
Vi bruker EDTA-blod. Blod tilsatt citrat eller CPD-A kan brukes.
For optimalt resultat bør prøven være ferskest mulig.
Reagenser og klargjøring av disse
ID-Diaclon anti-D, produkt-ID 09410, ref.nr. 007531.
ID-Card Coombs Anti-IgG, produkt-ID 50540, ref.nr. 004024, 004025 og 004026.
ID-Diluent 2, produkt-ID 05761, ref.nr. 009260.
ID-Diluent 2 for IH-500, ref.nr. 009290.
ID-Cellstab, produkt-ID 05740, ref.nr. 005650.
Alle reagensene er produsert av BioRad og levert av Norsk Labex.
Alle reagenser skal ha romtemperatur før bruk.
Analyseutstyr og klargjøring av disse
ID-Incubator for gelkort, innstilt på riktig temperatur, produsert av DiaMed, levert av Labex.
ID-Centrifuge for gelkort, innstilt på riktig hastighet og tid, produsert av DiaMed, levert av Labex.
Engangspipetter, bestilles fra sentrallageret.
Banjo ID-Reader, levert av Labex.
Cellevaskerør, levert av WWR.
IH-500, produsert av BioRad, levert av Labex.
Dette er en IAT-teknikk, positiv DAT vil derfor gi falsk positivt resultat.
Bakteriell kontaminasjon kan gi falske negative eller positive reaksjoner.
Fibrin legger seg som et lokk over gelen og kan gi falske reaksjoner.
Bruk av andre fortynningsløsninger enn Diluent 2 kan gi feil reaksjoner.
For svake eller for sterke cellesuspensjoner kan gi feil reaksjon.
Analysen «Ery-Rh Dw (D svak) antigen» bestilles automatisk ved RhD neg resultat i disse prøvene:
· ABO og RhD type og DAT, navlesnorsblod
· ABO og RhD type og DAT, barn under 3 måneder
· Nyregistrering av blodgivere
· 1. gangs tapping av blodgivere
OBS! Navlesnorsblod og kapillærprøver skal IKKE analyseres i IH-500!
Positiv og negativ kontroll analyseres hver dag vi utfører svak D-typing på IH-500. Bland opp og sentrifuger.
For analysering på IH-500 (KUN blodgivere): ALM-BB-Vakt; IH-500, Bruk og vedlikehold.
Manuell utførelse av analysen
· Bestill positiv og negativ kontroll i Quicstoffidentifisering (strekkoder i kopp sammen med kontrollene og reagenset)
· Tilordne kort på ID-Reader, Se prosedyre ALM-BB-Vakt; Bruk av ID-Reader med IH-Com
· Merk gelkortet med etikett fra ID-Reader
· Lag en 0,8% cellesuspensjon av 1,0 ml ID-Diluent 2 og 10 μl pakkede blodlegemer eller 20 μl fullblod. Bland godt. Cellesuspensjonen kan brukes med en gang
· Positiv og negativ kontroll er ferdige cellesuspensjoner klare til bruk
· Tilsett 50 μl cellesuspensjon til de respektive brønner
· Tilsett 50 μl ID DiaClon anti-D til hver brønn
· Inkuber kortet i 15 minutter ved 37 °C i ID-Inkubator
· Sentrifuger kortet i 10 minutter i ID-Sentrifugen
· Les av på ID-Reader. Sjekk brønnene mot resultat i IH-Com og velg Aksepter alle og Lagre
· IH-Com sier «ikke tolkbar» på resultater som er + til +++. Vi må konkludere manuelt og legge til kommentar, f.eks. Positiv kontroll. Se prosedyre: ALM-BB-Vakt; Bruk av ID-Reader med IH-Com
Vurdering av svar
Positiv reaksjon viser seg ved at de røde cellene ligger fordelt ned igjennom gelen. Negativ reaksjon når cellene ligger som en knapp i bunnen av brønnen.
Hvis barnet har positiv DAT, har det ingen hensikt å utføre svak D-typing, fordi dette er en IAT-teknikk. Vi legger da inn svaret fra Newbornkortet. Svak D må derfor slettes i Beaker med fastkommentar «Dsvak kan ikke utføres pga. positiv DAT».
Hvis barnet er positiv på svak D-typing, skal mor ha profylakse. På kveld/natt gis muntlig svar til rekvirent om dette. Gi beskjed til blodbankpersonalet slik at prøven blir besvart neste dag. Blodbankpersonalet tar kontakt med vakthavende lege, SOH, for hjelp med besvarelse og vurdering om prøve av mor og/eller barn bør sendes Ullevål for genomisk typing.
Hvis vi får en positiv svak D-typing på en blodgiver, må det utføres DAT på blodgiveren. Dette gjør vi for å kontrollere at den positive reaksjonen er reell og ikke skyldes positiv DAT.
Negativt resultat overføres til Beaker som Endelig verifisert.
Positivt resultat overføres til Beaker som Besvart og havner på Oppfølgingslista for videre utredning.
Typing av svak D må være ferdig verifisert før P538 på barn ≤ 3 mnd. kan utføres.
Se prosedyre ALM-IKT; Svarrapportering, Beaker.