Seksjonsleder på blodbanken sammen med medisinsk faglig rådgiver fra St. Olavs Hospital er ansvarlig for at teknikken og reagensene som brukes er validert og godkjent av norske helsemyndigheter. Den fagbioingeniør som har delegert ansvar for laboratorieanalysene på Levanger er ansvarlig for at prosedyren holdes oppdatert.
Konserveringsmiddel er Natrium-acid (Utvikler giftig gass i kontakt med syre).
Alle reagenser skal behandles som potensiell infeksiøs.
Prøvematerialet og bearbeidelse av dette
Vi bruker EDTA-blod. Det kan også benyttes citrat eller CPD-A prøver.
I følge leverandøren skal testen utføres umiddelbart, hvis ikke skal prøvene oppbevares ved 2-8 ºC i maksimalt 48 timer. Deretter kan prøven separeres og plasma oppbevares ved -20ºC.
Ettersom en del av prøvene vi analyserer er tatt i primærhelsetjenesten, er det umulig å analysere alle innen 48 timer. Vi har derfor bestemt at tilsendte prøver analyseres selv om de er eldre enn 48 timer. Prøvene bør ikke være eldre enn 7 døgn.
Prøver lagres ved 2-8 °C i minimum 1 uke.
Levanger: Pilotglass fra blodgivere lagres til SAG-posens utløpsdato.
Namsos: Pilotglass lagres 1 uke etter utlevering.
Reagenser og klargjøring av disse
DiaClon ABO/D + reverse grouping for patients, ref.nr. 001275v, produkt-id: 50741, gelkort produsert av BioRad, levert av Norsk Labex.
ID-DiaCell ABO, ref.nr. 003624, produsert av BioRad, levert av Norsk Labex.
ID-Diluent 2 Rack, ref.nr. 009290, produsert av BioRad, levert av Norsk Labex.
ID-Diluent 2, ref.nr. 009260, produsert av BioRad, levert av Norsk Labex.
For plassering av reagenser: Se egen reagensoversikt.
Reagensene må ha romtemperatur før de brukes. ID-Diluent 2 og blodlegemer til kontrollering lagres ved 2-8 °C, resten lagres i romtemperatur. ID-Diluent 2 Rack står i IH-500.
Alle kort som brukes inspiseres. Kort med skader eller luftbobler i gelen eller skadet lokk kasseres.
Levanger: Bytter ABO-celler i IH-500 når det er 3 ml igjen i glassene. Deretter settes de på benk.
Namsos: Bytter ABO-celler i IH-500 mandag og torsdag. Deretter settes de på benk.
Ved lite forbruk og dersom ABO-cellene blir stående i romtemperatur over lengre tid, er det viktig å huske på at de ikke skal ha vært i bruk mer enn 7 døgn fra åpning.
Analyseutstyr og klargjøring av disse
BioRad spesialsentrifuge for gelkort, levert av Norsk Labex.
ID-Reader, Banjo, levert av Norsk Labex.
Pipetter
ID-Reader
Fremgangsmåte/Utførelse av analysen
For bruk av IH-500, se prosedyre ALM-BB-Vakt; IH-500, Bruk og vedlikehold
Manuelt oppsett
· Tilordne kortet på IH-Com som tilhører ID-Reader, merk kortet med lappen derfra
· Ta av folien på kortet
Plasmakontroll
· Tilsett 50 µl A1-celler i brønn 5 og 50 µl B-celler i brønn 6
· Tilsett 50 µl av pasientens plasma i begge brønnene
· Inkuber i 10 min. ved romtemperatur
Erytrocyttsuspensjon til ABO-typingen
· Tilsett 0,5 ml ID-Diluent 2 til et rent rør merket med pasientens lab.nr.
· Tilsett 25 µl pakkede celler fra pasientprøven i glasset
· Erytrocyttsuspensjonen kan brukes med en gang
· Pipetter 10-12,5 µl av pasientens erytrocyttsuspensjon i brønn 1-4
· Sentrifuger i 10 min i ID-Sentrifuge
· Les av kort på ID-Reader og godkjenn resultatet i IH-Com
OBS!
· Sjekk i Beaker under Tidligere resultater i Uteståendelista om pasienten har kjent ABO/RhD-type
· Hvis ikke, sjekk i Prosang (også Søk info i annan databas – gjelder HMR) om det foreligger svar fra før oppstart av Beaker
· Dersom dette er første gangs ABO/RhD-typing av pasienten, må typingen utføres av 2 bioingeniører. Den siste typingen kan utføres i bioplate. For prøver som ikke er verifisert i Beaker, kan Batchliste skrives ut. Alternativt kan resultatutskrift fra IH-Com benyttes for å dokumentere den andre typingen.
Negativ
Blodlegemene ligger som en knapp i bunnen av gelen.
Positiv
Blodlegemene ligger på toppen av gelen, eller fordelt nedover i gelen (++++ til + reaksjon).
En RhD positiv vil vise seg som en +++ til++++ reaksjon der blodlegemene ligger som et lokk oppå, mens en svakere RhD-reaksjon vil ha blodlegemene trukket nedover i gelen + til ++ reaksjon. Ved RhD-reaksjon mindre enn +++, se prosedyre ALM-BB-Vakt; Besvarelse av svak RhD.
Hvis vi har svakere reaksjon
enn +++ med anti-A eller anti-B, kan dette tyde på undergrupper av A og/eller
B. Ved slike tilfeller, se prosedyre
ALM-BB-Vakt; Problemer ved AB0-typing.
Ved manuelt oppsett leses kortet av på ID-Reader Banjo. Det kreves minst 3+ reaksjon for anti-A, anti-B og anti-D for at svaret skal overføres til Beaker.
Svarene sendes over til Beaker som Foreløpig verifisert.
For besvaring av svak D, se prosedyre: ALM-BB-Vakt; Besvarelse av svak RhD.
Svarene verifiseres ved å utføre rutine P538 i ProSang.
Se prosedyre ALM-IKT; Svarrapportering, Beaker