ALM-BB-Vakt; Antistoffscreening v. 7.16

Arbeidsbeskrivelse

ARBEIDETS GANG

Spesielle forhold vedr. prøvetaking og forberedelse av pasient

Se prosedyre: ALM-MB-pre; Blodprøvetaking av voksne og barn

Prøvemateriale

Vi benytter EDTA-plasma.

I følge Veileder pkt. 11.4 skal ikke prøven være eldre enn 4 døgn ved transfusjonstidspunktet. Vår screening er gyldig i 4 døgn fra det klokkeslett screeningen er tatt.

Prøver lagres ved 2-8 °C i minimum 1 uke.

Reagenser og klargjøring av disse

ID-Card Coombs Anti-IgG” Kort nr. 5054

Alle reagenser skal ha romtemperatur før de brukes.

For lagring av reagenser, se ALM-BB-L; Reagensoversikt (Levanger) og ALM-BB-N; Reagensoversikt blodbank-lab (Namsos).

ID-DiaCell I-II-III, Artikkel nr. 004310. Leverandøren Norsk Labex oppgir at cellene er holdbare 7 døgn i IH-500

Levanger: Vi bytter screeningceller i IH-500 når det er 3 ml igjen i glassene. Deretter settes de på benk for evt. manuelt oppsett. Ved lite forbruk er det nødvendig å bytte screeningceller når det er større volum igjen fordi cellene som står på benk ikke skal ha vært i bruk mer enn 7 døgn fra åpning.

Namsos: Vi bytter screeningceller mandag og torsdag.

Vedlegg viser kontroller som er analysert i Tønsberg med tanke på holdbarhet av cellene.

Analyseutstyr og klargjøring av disse

Dia-Med spesialsentrifuge for gelkort, levert av Norsk Labex, ferdig innstilt på riktig tid og hastighet.
ID-Inkubator 37±2°C, levert av Norsk Labex.
Pipetter.

Feilkilder og interferens

Noen medisiner, f.eks. penicillin kan medføre positiv reaksjon.

Noen patologiske tilstander hos pasienten, f.eks. kulde, kan gi positiv reaksjon.

Bakteriell kontaminering kan gi falske positive eller falske negative reaksjoner.

Fibrin i plasma legger seg som et lokk øverst i brønnen. Prøven må sentrifugeres og settes opp på nytt.

For svake eller for sterke cellesuspensjoner kan gi feil reaksjon.

Fremgangsmåte/Utførelse av analysen

Analysering på IH-500

Se prosedyre: ALM-BB-Vakt; IH-500, Bruk og vedlikehold

Manuell analysering

• Tilordne kort i IH-Com for ID-Reader. Se prosedyre ALM-BB-Vakt; Bruk av ID-Reader med IH-Com

• Ta av folien og tilsett 50 ul av screeningcelle 1-3 i hver av de 3 brønnene som er merket med pasientens identitet

• Tilsett så 25 ul plasma fra pasienten i hver brønn

• Husk at det alltid må være en luftlomme mellom gelen i kortet og blandingen screeningceller/plasma

• Kortet settes til inkubering i inkubator 37° C i 15 min

• Kortet sentrifugeres i gelkortsentrifugen i 10 min

Avlesing av kort på ID-Reader Banjo: Velg Banjo og avles kort (evt. åpne lokk). Sett kortet i Banjo og velg Avles kort igjen. Velg Resultater og se på kortet. Godkjenn og Lagre.

Resultatet er negativt dersom blodlegemene ligger som en knapp i bunnen av gelen, positivt dersom blodlegemene ligger på toppen av gelen eller danner en "sky" gjennom gelen. Positive screeninger graderes fra + til ++++. Det blir gitt opplæring i gradering av positive screeninger i blodbankens opplæringsprogram. Hemolyse i brønnen er å betrakte som positivt resultat.

Godkjenning av svar på antistoffscreening

Svaret overføres fra IH-Com til Beaker som Foreløpig verifisert. Rutine P538 utføres når alle svar er ferdig. Hvis screening er positiv eller pasienten har hatt positiv screening tidligere, går laborationen til utredning. Det må gis beskjed til rekvirerende avdeling og dokumenteres i Komm.logg hvem som har tatt imot beskjeden. Se ALM-; Ringerutiner for Medisinsk biokjemi og Blodbank.

For videre behandling følges flytskjema under:

Antistoffidentifisering gjøres av blodbankpersonalet på Levanger. Før 21.30 tilkalles bakvakta, evt. prøver fra Namsos må da sendes til Levanger. Etter 21.30 må det settes opp utvidet forlik hvis pasienten må ha blod. Det tas hensyn til evt. tidligere funn og screeningresultatet vurderes opp mot antigrammet i forhold til hvilke antistoffer som er aktuelle.

Når det tas screening av en pasient som skal opereres eller som er aktuell for transfusjon av andre årsaker, må den som leser av screeningen gå inn i ProSang P000 og se på tidligere resultater. Hvis pasienten har negativ screening, men tidligere påvist antistoff, må den som besvarer screeningen legge en kommentar på screeningen i Beaker. I Resultatregistrering, trykk Rediger og klikk på bilde av arket til høyre i linja for Screening. Tast inn .bb i boksen som kommer opp og velg BB02: «Tidligere påvist irregulært erytrocyttantistoff. Det må utføres utvidet forlik». Dette gjør vi fordi anestesiavdelingen sjekker pasientens screeningresultat i «prøvesvar» i ROS, de ser på siste screening som er tatt.

For positiv screening og DARA-behandling, se prosedyre ALM-BB-Vakt; Blod til pasienter som behandles med Daratumumab/Isatuximab.

Hvis laborationen går til utredning og det ikke er nødvendig med antistoffidentifisering:

LEVANGER

Den som leser av screeningen, tar fram pasientens konvolutt fra antistoff-skuffa, fyller ut skjema " Svar antistoff " og signerer dette. Konvolutten og skjemaet legges på benken for besvaring i P551-552-583 av bioingeniør med opplæring i kommentering av antistoff så snart denne er på jobb. Konvolutten legges i skuffa og svaret blir godkjent i P968 av bioingeniør med godkjenning for verifisering av antistoffbesvarelser.

NAMSOS

Se prosedyre ALM-BB-N; Tiltak ved screening som går til utredning, Namsos.

Vaktene setter prøveglasset i eget stativ "Prøver til utredning".

Blodbankpersonell sjekker resultat på IH-500 når prøven skal besvares, evt ser i Beaker. P551-P552 og P583 utføres av bemyndiget person så snart denne er på jobb. Besvarelsen kan eventuelt utføres av bioingeniør på Levanger på samme måte som beskrevet under Levanger.

Levanger: Hver mandag tar vi ut en oversikt over ubesvarte utredninger. Den som utfører T&S har ansvar for å ta ut lista. Lista tas ut i P810(eller P811), velg Laborasjoner under arbeid. Labstatus 1-under utredning. Periodens start f. eks.: 010108. Periodens slutt- legg inn dagens dato. Type liste: Sortering på lab.id. Det er ikke nødvendig å fylle ut de andre feltene. Skriv ut liste.

Ved datastans

Se prosedyre: ALM-IKT; Nødrutiner ved datastans

Oppfølgende tiltak i forbindelse med svar

Merking av prøveglass

Dersom antistoffscreeningen er negativ, er det ingen merking på glasset, mens en positiv screening merkes med rød klistrelapp. Hvis pasienten har påvist antistoff i tidligere prøver, merkes screening-glasset med rødt selv om dagens screening er negativ. En rød etikett på screeningglasset betyr at det skal settes opp utvidet forlik, og at pasienten har et eller flere antistoffer.

Informasjon til rekvirent

Dersom man finner en positiv screening, skal avdelingen gis beskjed om dette slik at det kan vurderes om dette har betydning i forhold til videre behandling av pasienten. Dette dokumenteres i Komm.logg i Beaker. Dersom det samtidig foreligger en blodbestilling, må det avklares hvor lang tid pasienten kan vente med å få sin transfusjon. Dette er avgjørende for hvordan dette skal håndteres videre i forhold til evt. utkalling av bakvakt og måten prøven skal transporteres på fra Namsos (taxi eller buss).

Hensikt

Sikre at pretransfusjonsundersøkelsene blir utført forskriftsmessig, slik at pasienten får det forventede resultat av transfusjonen.

Omfang

Prosedyren gjelder alle bioingeniører som har fullført opplæring ved blodbanken og som er godkjent for antistoffscreening. Alle antistoffscreeninger skal settes opp så snart som mulig. Hvis analysen er rekvirert som haster, skal den være ferdig besvart innen 90 minutter. Hvis vi er sikker på at pasienten ikke skal ha blod, kan vi vente til vi får flere prøver, men alle screeninger skal være verifisert (evt. besvart) i løpet av 4 timer. Tilsendte screeninger som kommer på ettermiddag/kveld analyseres neste dag hvis ikke annet er avtalt.

Grunnlagsinformasjon

HISTORIKK

Metoden har vært i bruk siden 1990. Fra 08.02.11 kan analysen utføres på ID-Gelstation Plus på Levanger og fra våren 2013 på Namsos. Fra oktober 2017 har Levanger byttet ut Gelstation med IH-500. Namsos fikk IH-500 høsten 2019 og startet analysering på den i mars 2020.

ANALYSEPRINSIPP OG TERMINOLOGI

Et gelkort har 6 brønner fylt med gel tilsatt Anti-IgG rabbit. Et kort brukes derfor til prøver fra to pasienter. Gelen har en slik konsistens at røde blodlegemer som ikke har bundet antistoff, vil passere gjennom gelen og ned til bunnen av brønnen ved sentrifugering, mens røde blodlegemer med antistoff bundet til overflaten vil feste seg til antistoff som er tilsatt gelen.

Vi benytter røde blodlegemer fra spesialtypede givere. De er typet ut i de blodtypesystemene som har betydning for transfusjon. Et positivt resultat, dvs. tilstedeværelse av antistoffer i pasientens serum som reagerer med antigener på de røde cellene, vises ved at blodlegemene ikke ligger i bunnen av gelen etter sentrifugering, men som et lokk på toppen eller som en sky i selve gelen. Når vi sammenfatter reaksjonsmønstret, kan det gi en ide om hvilket/ hvilke antistoff som foreligger.

REFERANSER

Hovedreferanse: (1) Firma BioRads produkt og arbeidsbeskrivelse. Dia-Med-ID Micro Typing System. ID-Card Coombs Anti IgG”. Produkt-ID.: 50540 Ref.nr.; 04024, 04025 og 04026.

Offisielle godkjenninger: (2) Produsenten BioRad oppgir å være sertifisert etter ISO 9001:2000 og EN ISO 13435:2000 og oppgir å praktisere GMP. (1) har IVD-merke på reagensene.

Høring: Prosedyren har vært til høring hos alle som har arbeidssted blodbank og hos noen av de andre bioingeniørene som er godkjent for blodbankarbeid.

Nyttig litteratur: Blåboka" dvs.Immunologi og transfusjonslære" Utgitt av Statens Helsetilsyn på Universitetsforlaget 1995.
”Veileder for transfusjonstjenesten i Norge" Utgitt av Helsedirektoratet utgave 7.3 2017. https://helsedirektoratet.no/retningslinjer/veileder-for-transfusjonstjenesten-i-norge

Begge finnes på blodbanken.

INTERN KVALITETSKONTROLL

For mottakskontroll og siste forbruksdag, se prosedyre ALM-BB-L; Kontroll av screening- og identifiseringspanel (Levanger) og ALM-BB-N; Mottakskontroll kort og reagenser (MAL) (Ikke tilgjengelig) (Namsos).

Hver morgen kontrolleres cellene i screeningpanelet ved at vi kjører med en kjent anti-D og et kjent anti-Fya. Vi bruker IH-QC1 og IH-QC2, disse gir oftest 2-3+ reaksjon. Mandag-onsdag-fredag kjøres anti-c i tillegg. Anti-lille-c bør også gi en 2-3+ reaksjon. Kontrollen oppbevares ved 2-8 °C. Anti-c lages hver 14. dag, men er holdbar lenger. Det er viktig å følge med forandring i styrkegrad, spesielt for anti-Fya.

Fra 1. september 2019 slutter Levanger å rekvirere screeningkontroller i labdatasystemet, resultatene finnes bare på IH-Com tilknyttet ID-Reader.

EKSTERN KVALITETSKONTROLL

Nasjonal kvalitetskontroll av immunhematologiske prosedyrer. Arrangør: Avdeling for immunologi og transfusjonsmedisin, Blodbanken i Oslo. Frekvens 2-3 ganger pr. år.

Equalis, svensk kvalitetskontroll som sendes ut 10 ganger pr. år.

ANSVAR

Seksjonsleder på blodbanken i samarbeid med medisinsk faglig rådgiver fra St. Olavs hospital er ansvarlig for at analysene utføres med teknikker som er godkjent og anbefalt av norske helsemyndigheter. Den fagbioingeniøren som har ansvar for laboratorieanalysene på blodbanken, er ansvarlig for å holde prosedyren oppdatert.

Forfatter:	Lene Johnsen Salberg (Overbioingeniør)
Godkjent av:	Birgit Johanne Hoel Stubbe (Seksjonsleder)
Dokumentadministrator:	Tove Elisabeth Berg Vordal (Fagansvarlig bioingeniør)
Dokument-ID:	4155
Gyldig fra:	08.08.2024
Revisjonsfrist:	07.08.2029